| 人血管内皮生长因子C基因真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 高杰,刘执玉,董平,毕玉顺,田铧,李贵宝,宋涛.人血管内皮生长因子C基因真核表达载体的构建[J].山东大学学报(医学版),2003,41(2):151-154. |
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| 作者姓名： | 高杰 刘执玉 董平 毕玉顺 田铧 李贵宝 宋涛 |
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| 作者单位： | 山东大学医学院解剖学教研室 |
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| 摘 要： | 目的：构建人血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor C，VEGF-C)基因的真核表达载体，以便进一步研究VEGF-C基因在淋巴管生成中的作用。方法：根据人VEGF-C的cDNA序列，设计合成一对5′端分别含有EcoR I和BamH I酶切位点的特异性引物，运用RT-PCR方法克隆人乳腺癌细胞MDA-MB-231中的VEGF-C cDNA(1．26Kb；回收PCR产物(1．28Kb），并将其连接至克隆载体pMDl8-T中；重组的pMDl8-T在大肠杆菌DH5α内扩增后，经质粒提取、EcoR I和BamH I酶切，筛选出阳性重组子，并进行基因测序鉴定；琼脂糖凝胶电泳回收含有VEGF-C cDNA全长的酶切片断(1．27Kb)，然后在DNA连接酶作用下将其与真核表达载体pcDNA3．1(-)连接，重组质粒经EcoR I和BamH I酶切予以鉴定。结果：RT-PCR产物合有VEGF-C cDNA，基因测序显示重组的pMDl8-T中含有正确的人VEGF-C cDNA全长序列，重组的pcDNA3．1（-)中含有人VEGF-C cDNA全长序列。结论：成功构建了人类VEGF-C真核表达载体VEGF-C／pcDNA3．1（-)。
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| 关 键 词： | 内皮 血管 内皮生长因子 基因 真核表达 载体 |
| 文章编号： | 1671-7554(2003)02-0151-04 |
| 修稿时间： | 2002年8月20日 |
Construction of eukaryotic expression vector for human vascular endothelial growth factor C gene |
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| GAO Jie,LIU Zhi -yu,DONG Ping,et al.Construction of eukaryotic expression vector for human vascular endothelial growth factor C gene[J].Journal of Shandong University:Health Sciences,2003,41(2):151-154. |
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| Authors: | GAO Jie LIU Zhi -yu DONG Ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Endotheliaum vascular Endothelialgrowthfactors Gene Eukaryoticexpression Vector |
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