| 癌胚抗原启动子控制基因靶向表达研究 |
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| 引用本文： | 邱源,何建行,李富骊,刘启才,陈汉章,钟琰.癌胚抗原启动子控制基因靶向表达研究[J].中华生物医学工程杂志,2006,12(6). |
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| 作者姓名： | 邱源 何建行 李富骊 刘启才 陈汉章 钟琰 |
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| 作者单位： | 510120,广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所胸外科 |
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| 摘 要： | 目的 构建由癌胚抗原(CEA)启动子控制报道基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达的重组表达质粒CMVE-pCEA-IRES-EGFP.了解CEA启动子靶向驱动的含目的基因的重组质粒的效率.方法 构建重组质粒CMVE-pCEA-IRES-EGFP,以PCR,DNA测序及酶切进行鉴定.通过脂质体介导重组质粒CMVE-pCEA-IRES-EGFP体外分别转染A549细胞(CEA阳性)和16HBE(CEA阴性)细胞,进行绿色荧光蛋白检测分析基因表达的靶向性.结果 CMVE-pCEA-IRES-EGFP分别用VSP Ⅰ,VSP Ⅰ/Nhe Ⅰ酶切后电泳分别出现大小约405 bp,372 bp和4110 bp的片断,与预计各片断大小相符.以CMVE-pCEA-IRES-EGFP为模板PCR扩增得到CMV和CEA片段,分别连于T载体(pMD18-T)并测序,结果正确.嵌合启动子CMVE-pCEA能特异地驱动下游报告基因在CEA阳性肺癌细胞株绿色荧光表达阳性,而CEA阴性细胞株16HBE表达阴性.结论 成功构建了嵌合启动子CMVE-pCEA驱动的CMVE-pCEA-IRES-EGFP重组质粒,并能在转染的CEA阳性细胞株中表达,为靶向启动双基因表达载体构件提供了实验依据.
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| 关 键 词： | 癌胚抗原启动子 肿瘤 靶向表达 巨细胞病毒增强子 |
Study of CEA promoter controling aim gene target expression |
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| QIU Yuan,HE Jian-xing,LI Fu-li,LIU Qi-cai,CHEN Han-zhang,ZHONG Yan.Study of CEA promoter controling aim gene target expression[J].Chinese Journal of Biomedical Engineering,2006,12(6). |
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| Authors: | QIU Yuan HE Jian-xing LI Fu-li LIU Qi-cai CHEN Han-zhang ZHONG Yan |
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