细胞凋亡和继发性坏死的Annexin法定量检测

目的 探讨分析凋亡与坏死淋巴瘤（Raji)细胞的定量方法。方法 以1.0μmol/L地塞米松（DEX）诱导Raji细胞凋亡，用异硫氰酸荧光素标记的连接素V（Annexin V)和碘化丙锭（PI）分别与凋亡细胞膜上的磷脂酰丝氨酸和继发性坏死细胞内降解的DNA结合，并以流式细胞术分析和分选标记细胞，用电镜和DNA凝胶电泳对分选细胞及其DNA进行鉴定。结果 Annexin^ 细胞数随DEX孵育时间的延长而增加（r=0.97)；Annexin^ /PI^-与Annexin^ /PI^ 细胞经电镜和DNA梯形带确证具有凋亡与坏死细胞的特征；Annexin法可准确测定10^5-10^6细胞中标记细胞。结论 Annexin法可快速、准确地定量混合细胞内的凋亡与坏死细胞数。