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| 重组人血管抑素的纯化和生物活性鉴定 | |
| 引用本文： | 卢文菊,张晓实,罗进贤,陈柏铭.重组人血管抑素的纯化和生物活性鉴定[J].广州医学院学报,2001,29(2):5-8. |
| 作者姓名： | 卢文菊 张晓实 罗进贤 陈柏铭 |
| 作者单位： | 1. 广州医学院检验系, 2. 中山医科大学肿瘤防治中心, 3. 中山大学生命科学学院, |
| 基金项目： | 国家自然科学基金（39670013），广东省自然科学基金（960052）资助项目。 |
| 摘 要： | 目的：纯化大肠杆菌表达的重组人血管抑素（ｒｈＡＧＮ）并鉴定其抗血管生成生物活性。方法：通过超声破碎、包涵体洗涤、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００ 凝胶过滤层析等步骤初步纯化ｒｈＡＧＮ，Ｌｏｗｒｙ法测定蛋白浓度，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析观察其纯度；应用 ＭＴＴ法观察在终浓度为 ０．１～３．０ ｍｇ／Ｌ范围内 ｒｈＡＧＮ对 １０ μｇ／Ｌ ＥＧＦ刺激的人真皮微血管内皮细胞系ＨＤＭＥＣ的增殖抑制活性；以ＰＢＳ为对照（ｎ＝５），应用原位鸡胚绒毛尿囊膜（ＣＡＭ）技术观察１００ μｇ／只（ｎ＝５）和２００ μｇ／只（ｎ＝５）ｒｈＡＧＮ作用７２ ｈ对３０ｎｇ ｂＦＧＦ 诱导的鸡胚ＣＡＭ毛细血管生成的抑制作用。结果：①ｒｈＡＧＮ电泳纯度达到 ９６％，总回收率为 ６１．７％；②ｒｈＡＧＮ对 ＨＤＭＥＣ细胞增殖的最大抑制剂量约为 ２．０ ｍｇ／Ｌ，抑制率约９２．３％．半数最大抑制剂量在１．０ ｍｇ／Ｌ附近；③１００ μｇ／只和２００ μｇ／只ｒｈＡＧＮ组鸡胚ＣＡＭ 载样滤纸片下毛细血管数目分别为７９±２３条和３７±１１条，两组间比较差异显著（Ｐ＜０．０５）；与对照组（１４５±３６条）相比，均有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论：ｒｈＡＧＮ达到了较高的电泳纯度， |
| 关 键 词： | 重组人 血管抑素 重组蛋白质类 纯化 生物活性 鉴定 rhAGN |
| 文章编号： | 1008-1836(2001)02-0005-04 |
| 修稿时间： | 2001年4月25日 |
Purification and Antiangiogenic Activity Assay of Recombinant Human Angiostatin |
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| LU Wen-ju,ZHANG Xiao-shi,LUO Jin-xian.Purification and Antiangiogenic Activity Assay of Recombinant Human Angiostatin[J].Academic Journal of Guangzhou Medical College,2001,29(2):5-8. | |
| Authors: | LU Wen-ju ZHANG Xiao-shi LUO Jin-xian |
| Abstract: | |
| Keywords: | angiostatin recombinant protein purification biological activity assay |
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