角叉菜胶炎性痛及痛过敏诱导大鼠脊髓后角神经元一氧化氮合酶变化的时间特征

目的：观察角叉菜胶炎性痛及痛过敏中脊髓后角一氧化氮合酶的变化，特别是其时间特征。 方法：实验于2004-05／08在河北工程学院医学院生理学实验室完成。选用清洁级健康雄性Wistar大鼠40只，随机分为5组，每组8只：对照组：不加任何处理。注射角叉菜胶12h组，注射角叉菜胶24h组，注射角叉菜胶48h组，注射角叉菜胶72h组，大鼠右后掌足跖部皮下注射30异／L角叉菜胶0．1mL建立炎性痛模型，分别在注射角叉菜胶后12，24，48，72h取材。应用尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶组织化学法测定脊髓一氧化氮合酶表达。应用光学显微镜下观察并计数脊髓后角Ⅰ～Ⅱ板层内尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞数目；应用HPLAS-1000高清晰度彩色病理图文分析系统软件测定尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞的灰度值，用于定量分析染色深度，灰度值与染色深度呈反比。结果：纳入动物40只，均进入结果分析。①L5脊髓后角Ⅰ～Ⅱ板层尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞数量的变化：对照组可见少量尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞，注射角叉菜胶后12，24，48h，无论是同侧还是对侧的脊髓后角Ⅰ～Ⅱ板层内，阳性细胞数目均较对照维增加，24h达到高峰，以后逐渐减少，至72h，两侧均恢复至对照水平。此外，两侧脊髓后角比较，在注射角叉菜胶后各时间点，注射侧的阳性细胞数目均比对侧多。②L5脊髓后角Ⅰ-Ⅱ板层尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞染色深度的变化：注射角叉菜胶后，双侧脊髓后角尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞染色均逐渐加深，至24h达高峰，以后逐渐降低。统计结果表明，12，24，48h组阳性细胞染色深度均较对照组明显加深（即灰度值降低），其中24h加深最显著；至72h时，注射部位对侧脊髓后角Ⅰ-Ⅱ板层内的阳性细胞染色已恢复至对照组水平，而同侧尚未降至对照组水平。两侧比较，发现注射角叉菜胶后各时间点，注射同侧均较对侧阳性细胞染色加深。 结论：角叉菜胶炎性痛及痛过敏中，脊髓后角一氧化氮合酶活性增强，且这种增强有一定的时间变化特征。

Time characteristics of changes of nitric oxide synthase activity in neurons of spinal cord posterior horn in rats with carrageenan-induced inflammatory pain and hyperalgesia