| 人BMP-7基因重组腺病毒的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 方针强,叶钢,欧阳一辛,刘永亮,贾维胜,冯嘉瑜. 人BMP-7基因重组腺病毒的构建与鉴定[J]. 第三军医大学学报, 2008, 30(2): 153-156 |
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| 作者姓名： | 方针强 叶钢 欧阳一辛 刘永亮 贾维胜 冯嘉瑜 |
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| 作者单位： | 第三军医大学新桥医院,泌尿外科,全军肾脏病中心,重庆,400037;第三军医大学新桥医院,检验科,重庆,400037 |
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| 摘 要： | ![]()
目的 构建含有人骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)基因的重组腺病毒载体,并对其相关指标进行鉴定,观察其对肾小管上皮细胞株(HKC)细胞的转染情况.方法 用基因工程技术将人BMP-7基因cDNA亚克隆至穿梭质粒pDC316上,利用脂质体介导的方法将AdMax腺病毒包装系统的骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre和穿梭质粒pDC316-BMP-7转染入HEK293细胞,进行同源重组,得到腺病毒重组质粒Ad5-BMP-7,并在其中包装扩增病毒.采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中所带绿色荧光蛋白GFP报告基因,进行病毒滴度的测定和对HKC细胞感染效率的检测.结果 酶切鉴定及PCR结果证明BMP-7基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度达1.25 × 1010PFU/ml,对HKC有较强感染能力.结论 应用细胞内同源重组方法成功构建了含人BMP-7基因的重组腺病毒载体.
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| 关 键 词： | 腺病毒 骨形成蛋白-7 同源重组 |
| 文章编号： | 1000-5404（2008）02-0153-04 |
| 收稿时间： | 2007-09-01 |
| 修稿时间： | 2007-10-11 |
Construction and identification of human BMP-7 gene recombinant adenovirus |
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| FANG Zhen-qiang,YE Gang,OUYANG Yi-xin,LIU Yong-liang,JIA Wei-sheng,FENG Jia-yu. Construction and identification of human BMP-7 gene recombinant adenovirus[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2008, 30(2): 153-156 |
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| Authors: | FANG Zhen-qiang YE Gang OUYANG Yi-xin LIU Yong-liang JIA Wei-sheng FENG Jia-yu |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | adenovirus BMP-7 gene homogenous recombination |
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