核转录因子YY1对缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡的影响及其机制 |
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引用本文: | 陈红梅,王伟,王新全,李良鹏,王旭开,曾春雨,王红勇. 核转录因子YY1对缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡的影响及其机制[J]. 第三军医大学学报, 2016, 0(9): 932-937. DOI: 10.16016/j.1000-5404.201510023 |
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作者姓名: | 陈红梅 王伟 王新全 李良鹏 王旭开 曾春雨 王红勇 |
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作者单位: | 400042重庆,第三军医大学大坪医院野战外科研究所心血管内科,重庆市心血管病研究所 |
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基金项目: | Supported by the Key Project of Natural Science Foundation of Chongqing (CSTC2011jjB10020).重庆市自然科学基金重点项目(CSTC2011JJB10020) |
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摘 要: | 目的 探讨核转录因子阴阳1 (yin yang 1,YY1)对体外缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用及其机制.方法 体外分离培养新生大鼠心肌细胞,利用无糖培养基及含95% N2+5% CO2混合气体的缺氧装置(Billups-rothenberg)诱导建立缺血缺氧心肌细胞凋亡模型,通过建立过表达YY1重组质粒并将其转染入心肌细胞内,观察YY1对缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡的影响.实验分为对照组、YY1组、缺血缺氧组、缺血缺氧+YY1组、缺血缺氧+LY294002组、缺血缺氧+YY1+LY294002等6组(n=4).CCK-8法检测各组心肌细胞活力,TUNEL法检测各组心肌细胞凋亡情况,fQT-PCR检测YY1 mRNA表达水平,Westem blot法检测YY1、磷酸化丝氨酸苏氨酸激酶(p-Aktser473)及生存素(Survivin)蛋白表达水平.结果 与对照组相比,缺血缺氧组在缺血缺氧刺激6h后心肌细胞活力下降、凋亡率明显增高[(0.55 ±0.02) vs (1.14±0.02)、(38.25 ±1.65)% vs (1.38±0.15)%,P<0.01].缺血缺氧前预转染YY1重组质粒后,与缺血缺氧组相比,缺血缺氧+YY1组心肌细胞活力上升、凋亡率降低、p-Aktser473和Survivin蛋白表达增加[(0.78 ±0.03) vs (0.55 ±0.02)、(14.50±1.56)% vs (38.25±1.65)%、p-Aktser473相对灰度值:(0.82±0.03) vs (0.28 ±0.03)、Survivin相对灰度值:(0.93 ±0.02) vs (0.36±0.02),P<0.01].经PI3K/Akt信号通路特异性抑制剂LY294002干预后,缺血缺氧+ YY1+LY294002组与缺血缺氧+YY1组相比,心肌细胞活力下降、凋亡率增加、p-Aktser473和Survivin蛋白表达显著降低[(0.62 ±0.02) vs (0.78 ±0.03)、(27.75±1.12)%vs (14.50±1.56)%,p-Aktser473相对灰度值:(0.43 ±0.02)vs(0.82±0.03),Survivin相对灰度值:(0.27 ±0.02) vs (0.93 ±0.02),P<0.01].结论 核转录因子YY1可抑制缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡,且该作用与PI3K/Akt信号通路的激活相关.
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关 键 词: | 心肌细胞 细胞凋亡 yin yang 1 缺血缺氧 PI3K/Akt信号通路 |
Effects and related mechanisms of transcription factor Yin Yang 1 on ischemic hypoxia induced cardiomyocytes apoptosis |
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Abstract: |
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Keywords: | cardomyocytes apoptosis Yin Yang 1 ischemia-hypoxia PI3K/Akt signal pathway |
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