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| 核心结合因子(Cbfa1/Runx2)重组腺病毒载体的构建、鉴定及在脂肪来源干细胞中的表达 | |
| 引用本文： | 张辛,杨民,林霖,陈苹,马康涛,敖英芳,周春燕. 核心结合因子(Cbfa1/Runx2)重组腺病毒载体的构建、鉴定及在脂肪来源干细胞中的表达[J]. 中国运动医学杂志, 2008, 27(1): 67-71 |
| 作者姓名： | 张辛 杨民 林霖 陈苹 马康涛 敖英芳 周春燕 |
| 作者单位： | 1. 北京大学第三医院运动医学研究所,北京,100083 2. 皖南医学院弋矶山医院骨科 3. 北京大学医学部生物化学与分子生物学系 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30671016) |
| 摘 要： | 目的:验证核心结合因子(Cbfa1/Runx2)的重组腺病毒载体可高效感染脂肪组织来源干细胞并表达蛋白。方法:分离、扩增脂肪组织来源干细胞并诱导其向骨细胞、脂肪细胞分化。将Cbfa1/Runx2cDNA的全长序列亚克隆到穿梭质粒pAdTrack上,在BJ5183细菌内和pAdEasy1同源重组,筛选阳性克隆,命名为Ad-Cb-fa1/Runx2。经酶切、PCR鉴定,线性化后以脂质体法转染293T细胞进行包装、扩增,利用报告基因GFP对病毒滴度和感染效率进行监测。通过RT-PCR、间接免疫荧光检测Ad-Cbfa1/Runx2感染脂肪组织来源干细胞后Cbfa1/Runx2基因的表达。结果:脂肪组织来源干细胞细胞数目两天增长一倍。在特定诱导条件下,可向成脂细胞、成骨细胞分化。酶切及PCR鉴定证实Cbfa1/Runx2基因重组腺病毒载体构建成功。Ad-Cbfa1/Runx2对脂肪组织来源干细胞的转染效率为81.39%。转染3天后,PCR、间接免疫荧光检测到脂肪组织来源干细胞中Cbfa1/Runx2蛋白的表达。结论:成功分离、培养了脂肪组织来源干细胞,构建了含有小鼠Cbfa1/Runx2基因的重组腺病毒载体,证明了Ad-Cbfa1/Runx可高效感染脂肪组织来源干细胞并表达Cbfa1/Runx2蛋白。 |
| 关 键 词： | 核心结合因子 脂肪组织来源干细胞 腺病毒载体 |
| 修稿时间： | 2007-07-13 |
Construction of Recombinant Adenovirus Cbfa1/Runx2 and Its Expression in Adipose-derived Stem Cells |
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| Zhang Xin,Yang Min,Lin Lin,Chen Ping,Ma Kangtao,Ao Yingfang,Zhou Chunyan. Construction of Recombinant Adenovirus Cbfa1/Runx2 and Its Expression in Adipose-derived Stem Cells[J]. Chinese Journal of Sports Medicine, 2008, 27(1): 67-71 | |
| Authors: | Zhang Xin Yang Min Lin Lin Chen Ping Ma Kangtao Ao Yingfang Zhou Chunyan |
| Abstract: | |
| Keywords: | core binding factor(Cbfa1) adipose-derived stem cells(ADSCs) adenovirus vector |
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