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TRAF1基因干扰质粒的构建及其对胃癌细胞生物学功能的影响
引用本文:王芬,杨燕,冯茜,步光奎,黄利华,闾宏伟,郭勤,徐灿霞,沈守荣. TRAF1基因干扰质粒的构建及其对胃癌细胞生物学功能的影响[J]. 中南大学学报(医学版), 2012, 37(9): 876-882
作者姓名:王芬  杨燕  冯茜  步光奎  黄利华  闾宏伟  郭勤  徐灿霞  沈守荣
作者单位:1. 中南大学湘雅三医院消化内科,长沙,410013
2. 湘潭市中心医院消化内科,湖南湘潭,411100
摘    要:
目的:构建T F1基因干扰重组质粒及建立T F1基因干扰瞬时转染胃癌细胞模型,然后通过干扰目标胃癌细胞中的T F1基因来检测T F1对胃癌细胞的生物学功能的影响。方法:首先通过real-time PCR和Western印迹验证T F1在胃癌细胞系BGC823,SGC7901,MGC803中的表达,筛选出T F1表达量最高的一株细胞作为干扰转染的目标细胞;设计及构建3个T F1的shRNA表达载体pLVX-shRNA-T F1-shRNA1~3,将其分别转染至目标胃癌细胞系中,应用real-time PCR和Western印迹筛选出干扰效率最强的shRNA,最后通过M及流式细胞术检测T F1对胃癌细胞凋亡能力的影响,通过Transwell小室迁移实验来检测对其迁移功能的影响。结果:与GES-1比较,T F1基因在BGC823,SGC7901,MGC803中的表达均有上调(P<0.05),其中以BGC823表达最高;3个T F1shRNA对T F1基因均有抑制作用,以pLVX-shRNA-T F1-shRNA2干扰效果最强;干扰胃癌细胞BGC823中的T F1可使细胞生长活力减弱,凋亡明显增加,但对其迁移功能无明显影响。结论:T F1基因在胃癌细胞系BGC823中上调最明显;pLVX-shRNA-T F1-shRNA2可成功干扰BGC823中T F1的表达;T F1可抑制BGC823细胞的凋亡。

关 键 词:TRAF1  干扰  胃癌细胞系

Construction of RNAi targeting TRAF1 gene and effect of TRAF1 on gastric cancer cells
WANG Fen , YANG Yan , FENG Qian , BU Guangkui , HUANG Lihua , L Hongwei , GUO Qin , XU Canxia , SHEN Shourong. Construction of RNAi targeting TRAF1 gene and effect of TRAF1 on gastric cancer cells[J]. Journal of Central South University. Medical sciences, 2012, 37(9): 876-882
Authors:WANG Fen    YANG Yan    FENG Qian    BU Guangkui    HUANG Lihua    L Hongwei    GUO Qin    XU Canxia    SHEN Shourong
Affiliation:WANG Fen , YANG Yan , FENG Qian , BU Guangkui , HUANG Lihua , L(U) Hongwei , GUO Qin , XU Canxia , SHEN Shourong
Abstract:
Keywords:
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