整合素α4半胱氨酸突变质粒的构建及谷胱甘肽化水平检测 |
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引用本文: | 尤媛媛,陈善泽,李东珏,郭婧,黄宁,李婧瑜.整合素α4半胱氨酸突变质粒的构建及谷胱甘肽化水平检测[J].四川生理科学杂志,2018(4). |
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作者姓名: | 尤媛媛 陈善泽 李东珏 郭婧 黄宁 李婧瑜 |
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作者单位: | 四川大学华西基础医学与法医学院病理生理教研室;四川大学华西基础医学与法...;1广西医科大学生物化学与...;昆明医科大学第一附属医院...;首都医科大学燕京医学院医...;延边大学农学院;汪清县汪...;中国医药工业研究总院上海...;苏州工业园区服务外包职业...;首都医科大学;;西南大学家蚕基因组生物学...;广州医科大学附属第一医院... |
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摘 要: | 目的:旨在构建整合素α4半胱氨酸突变质粒,并初步鉴定α4的谷胱甘肽化修饰位点。方法:利用点突变技术将整合素α4的半胱氨酸残基分别突变为天冬氨酸残基,以免疫共沉淀的方法利用anti-Flag琼脂糖珠富积突变的α4蛋白,采用体外谷胱甘肽化的方法检测突变α4的谷胱甘肽化水平。结果:构建了α4的81、85、278、717、767、828位的半胱氨酸单突变质粒,体外谷胱甘肽化检测表明这些单突变的α4仍具有谷胱甘肽化修饰。结论:成功构建了整合素α4所有的未形成二硫键的半胱氨酸突变的真核表达质粒,初步判定α4可能具有多个位点半胱氨酸残基同时被谷胱甘肽化修饰。
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