萝卜硫素通过TGF-β/Smad3信号通路对肾病综合征大鼠系膜细胞增生的影响

【摘要】 目的 探讨萝卜硫素通过转化生长因子（TGF-β）/smad3信号通路对肾病综合征大鼠系膜细胞增生的影响及其作用机制。方法 采用2μM TGF-β诱导大鼠肾小球系膜细胞（HBZY-1）增生，将细胞分为对照组、TGF-β刺激组、TGF β联合20 μM萝卜硫素组及TGF-β联合40 μM萝卜硫素组。5 mg/kg阿霉素诱导肾病综合征大鼠模型，不同剂量萝卜硫素处理HBZY-1细胞及肾病综合征大鼠，将大鼠分为空白对照组、阿霉素刺激组、阿霉素联合30 mg/kg萝卜硫素组及阿霉素联合60 mg/kg萝卜硫素组，每组各8只；采用CCK8法检测HBZY-1细胞增殖，HE染色分析肾病综合征大鼠肾组织系膜基质沉积，Western Blotting方法检测粘连蛋白（FN）、Ⅳ胶原蛋白（Col4）、TGF-β及p Smad3蛋白表达水平。结果 TGF-β刺激组能明显诱导HBZY-1细胞增生及HBZY-1细胞FN和Col4蛋白表达，与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）；TGF-β联合20、40 μM萝卜硫组与TGF-β刺激组相比能明显抑制TGF-β诱导的HBZY-1细胞增殖和明显抑制TGF β诱导的FN和Col4蛋白表达（P＜0.05）。阿霉素诱导肾病综合症大鼠肾脏系膜基质沉积增多（P＜0.05），而不同剂量萝卜硫素治疗后，能显著降低肾脏系膜基质沉积（P＜0.05）。阿霉素刺激组能明显诱导大鼠肌酐、尿素氮及24小时蛋白尿量水平升高和大鼠肾脏组织FN、Col4、TGF-β、p-Smad3蛋白表达，与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）；与阿霉素刺激组相比，不同剂量萝卜硫素能明显降低大鼠肌酐、尿素氮及24小时蛋白尿量水平、降低肾脏组织FN、Col4、TGF-β、p-Smad3蛋白表达水平（P＜0.05）。结论 萝卜硫素可通过下调TGF-β/Smad3信号传导抑制基质合成相关蛋白表达，进而降低了肾病综合征大鼠肾小球系膜细胞增生。