| 靶向核定位序列siRNA对乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA复制的抑制作用 |
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| 引用本文： | 陈姝,杨光,刘晓松,崔金环,吴祖常,王晓萍.靶向核定位序列siRNA对乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA复制的抑制作用[J].广东医学,2012,33(20):3036-3039. |
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| 作者姓名： | 陈姝 杨光 刘晓松 崔金环 吴祖常 王晓萍 |
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| 作者单位： | 广东省佛山市第一人民医院临床医学研究所,528000 |
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| 基金项目： | 广东省佛山市科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 目的 针对乙型肝炎病毒(HBV)核心蛋白羧基端核定位信号(NLS)区设计并化学合成2条小干扰RNA(siRNA),观察其对共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)水平的影响.方法 将siRNA转染可稳定分泌HBV颗粒的HepG2.2.15细胞,转染后72 h,采用ELISA方法检测上清液中HBsAg、HBeAg的含量,采用Real-time PCR定量检测细胞内cccDNA及细胞培养上清HBV DNA拷贝数.RT-PCR检测靶基因mRNA的抑制效果.结果 靶向NLS区的2条siRNA均能不同程度地降低HepG2.2.15细胞cccDNA水平,抑制HBV DNA的复制及HBeAg的分泌,对cccDNA的抑制率分别为93.30％和85.00％(P＜0.01),对HBV mRNA抑制率分别为62.80％和48.90％,对HBV DNA抑制率分别为76.56％和66.41％(P＜0.01),对HBeAg抑制率分别为57.25％、43.48％(P＜0.01).而无关序列对HBV DNA与cccDNA的复制和HBeAg表达几乎无干扰作用.结论 靶向HBV核心蛋白C末端核定位序列的siRNA可特异、高效、稳定地显著降低HBV cccDNA水平,抑制HBV DNA复制及HBeAg分泌,为应用RNA干扰治疗HBV感染奠定了一定基础.
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| 关 键 词： | 小干扰RNA 核定位序列 乙型肝炎病毒 共价闭合环状DNA |
The inhibitory effecacy of siRNAs targeting nuclear localization signal region on hepatitis B virus covalently closed circular DNA |
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| CHEN Shu
,
YANG Guang
,
LIU Xiaosong
,
CUI Jin-huan
,
WU Zu-chang
,
WANG Xiao-ping.The inhibitory effecacy of siRNAs targeting nuclear localization signal region on hepatitis B virus covalently closed circular DNA[J].Guangdong Medical Journal,2012,33(20):3036-3039. |
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| Authors: | CHEN Shu YANG Guang LIU Xiaosong CUI Jin-huan WU Zu-chang WANG Xiao-ping |
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