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携带mda7/IL24的三调控增殖腺病毒治疗肝癌的体外实验
引用本文:陈东锋,那曼丽,苏长青,李林芳,吴红平,钱炎珍,姜丽华,吴孟超,钱其军. 携带mda7/IL24的三调控增殖腺病毒治疗肝癌的体外实验[J]. 肿瘤, 2008, 28(5): 382-385. DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2008.05.004
作者姓名:陈东锋  那曼丽  苏长青  李林芳  吴红平  钱炎珍  姜丽华  吴孟超  钱其军
作者单位:1. 浙江理工大学生命科学院新元医学生物研究所,杭州,310018
2. 第二军医大学东方肝胆外科医院病毒与基因治疗实验室,上海,200438
3. 浙江理工大学生命科学院新元医学生物研究所,杭州,310018;第二军医大学东方肝胆外科医院病毒与基因治疗实验室,上海,200438
摘    要:
目的:构建缺失E1A区24bp,由端粒酶反转录酶基因启动子和缺氧基因启动子调控的增殖腺病毒SG600-IL24,研究人白细胞介素24(interleukin 24,IL24)在肝癌细胞内的表达水平和SG600-IL24的增殖情况及其对肝癌细胞的杀伤作用。方法:利用DNA克隆和重组技术,构建SG600-IL24。ELISA检测IL24在肝癌细胞SMMC-7721、BEL4404和正常成纤维细胞BJ内的表达。半数组织培养感染剂量(50% tissue culture infectious dose,TCID50)法检测SG600-IL24在3种细胞内48和96h的增殖情况。MTT法和细胞病理效应(cytopathic effect,CPE)染色法检测SG600-IL24在不同MOI值对3种细胞的杀伤作用。结果:IL24在SMMC-7721和BEL-7404细胞内高表达而在BJ细胞内低表达。感染48和96h后,SG600-IL24在SMMC-7721、BEL-7404和BJ细胞内分别增殖794和7940倍、622和7810倍、20和200倍。MTT结果显示,杀伤50%和90%的SMMC-7721、BEL-7404和BJ细胞所需SG600-IL24的MOI值分别为0.3和5,3和20,50和150。CPE染色显示,SG600-IL24对肝癌细胞SMMC-7721和BEL-7404有明显杀伤作用,而对BJ细胞无明显影响,并且该病毒的杀伤能力比增殖腺病毒ZD55-IL24和非增殖腺病毒Ad-IL24强。结论:SG600-IL24高效感染肝癌细胞SMMC-7721和BEL-7404后,病毒增殖活跃,IL24的表达量显著升高。SG600-IL24对此2种肝癌细胞有良好的特异性杀伤作用,而对正常细胞没有明显影响,为应用该病毒治疗肝癌的体内研究建立了基础。

关 键 词:肝肿瘤  实验性  白细胞介素24  增殖性腺病毒  缺氧反应元件  调控  增殖腺  病毒  治疗肝癌  体外实验  adenovirus vector  triple  effect  Therapeutic  in vitro  体内研究  应用  正常细胞  表达量  杀伤能力  影响  染色显示  感染剂量  结果  染色法
文章编号:1000-7431(2008)05-0382-04
修稿时间:2007-09-07

Therapeutic effect of triple regulated adenovirus vector expressing mda7/IL24 on liver cancer in vitro
CHEN Dong-feng,NA Man-li,SU Chang-qing,LI Lin-fang,WU Hong-ping,QIAN Yan-zhen,JIANG Li-hua,WU Meng-chao,QIAN Qi-jun. Therapeutic effect of triple regulated adenovirus vector expressing mda7/IL24 on liver cancer in vitro[J]. Tumor, 2008, 28(5): 382-385. DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2008.05.004
Authors:CHEN Dong-feng  NA Man-li  SU Chang-qing  LI Lin-fang  WU Hong-ping  QIAN Yan-zhen  JIANG Li-hua  WU Meng-chao  QIAN Qi-jun
Abstract:
Keywords:
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