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| 美洲大蠊变应原Cr-PⅡ基因的克隆、表达及结构预测 | |
| 作者姓名： | 何毅华 刘志刚 邢苗 杨豪 |
| 作者单位： | 深圳大学生命科学学院,深圳,518060;深圳大学生命科学学院,深圳,518060;深圳市微生物基因工程重点实验室,深圳,518060 |
| 基金项目： | 中国科学院资助项目;广东省科技厅科技计划;广东省深圳市科技计划 |
| 摘 要： | 采用RT-PCR技术从美洲大蠊中扩增出变应原Cr-pⅡ基因,并将其克隆至pMD18-T载体中.经序列测定和分析证实,所克隆的片段含有长度为1 185 bp的完整开放阅读框(ORF),与台湾株来源的Cr-pⅡ(Per a1.0103)有95.9%的同源性.用Nde Ⅰ和Not Ⅰ将目的片段从T载体中切下,定向亚克隆入表达载体pET24a(+),然后成功转化大肠杆菌菌株BL21 Star.经IPTG诱导得到45kDa的重组蛋白,Western-blot分析表明其具有良好的IgE结合活性.并通过生物信息学方法获得了目的蛋白的抗原表位和3D结构模型. |
| 关 键 词： | 美洲大蠊 变应原 Cr-pⅡ 克隆 表达 |
| 修稿时间： | 2005-06-27 |
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