| Sema3A-Fc真核表达载体构建及诱导少突胶质细胞祖细胞迁移作用观察 |
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| 引用本文： | 陈焕然,黄其林,杨辉,马玉新,张伟.Sema3A-Fc真核表达载体构建及诱导少突胶质细胞祖细胞迁移作用观察[J].创伤外科杂志,2008,10(3):264-267. |
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| 作者姓名： | 陈焕然 黄其林 杨辉 马玉新 张伟 |
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| 作者单位： | 第三军医大学新桥医院神经外科,重庆,400037 |
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| 基金项目： | 重庆市自然科学基金
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第三军医大学校科研和教改项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建真核表达载体pIGSema3A-Fc,并观察Sema3A-Fc融合蛋白对少突胶质细胞祖细胞(OPCs)迁移的作用.方法 运用DNA重组技术自原核表达载体上将鸡来源的Sema3A基因克隆到真核表达载体pIGIsG1Fc上,并用双酶切、测序法进行鉴定.采用脂质体法转染非洲绿猴肾细胞株(COS-7)细胞进行融合蛋白表达,培养3天后提取上清液,经蛋白A亲和纯化,Western blotting进行鉴定.利用插入式细胞迁移小室(millicell-PCF)细胞迁移仓观察其对OPCs细胞迁移的诱导作用.结果 重组质粒双酶切产生了2.24kb目的 片段及5.7kb载体片段.测序证实构建的Sema3A膜外区与Sema3A-Fc cDNA阅读框完整,连接部位序列正确;Western blotting证实有Sema3A-Fc融合蛋白表达.迁移试验证明其对少突胶质细胞祖细胞迁移具有推斥作用.结论 成功构建了Sema3A-Fc真核表达载体,并使有生物学活性的Sema3A-Fc融合蛋白在COS-7细胞上获得了稳定表达,为进一步研究OPCs细胞定向迁移奠定了基础.
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| 关 键 词： | Sema3A-Fc融合蛋白 真核表达 细胞迁移 真核表达载体构建 少突胶质细胞 细胞迁移 作用观 migration cells precursor induction eukaryotic expression vector 定向迁移 研究 稳定表达 生物学活性 推斥 验证 序列 连接部 阅读框 膜外区 测序 |
| 文章编号： | 1009-4237(2008)03-0264-04 |
| 修稿时间： | 2007年10月24 |
Construction of Sema3A-Fc eukaryotic expression vector and its induction of oligodendrocyte precursor cells migration |
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| CHEN Huan-ran,HAUNG Qi-lin,YANG Hui,et al..Construction of Sema3A-Fc eukaryotic expression vector and its induction of oligodendrocyte precursor cells migration[J].Journal of Traumatic Surgery,2008,10(3):264-267. |
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| Authors: | CHEN Huan-ran HAUNG Qi-lin YANG Hui |
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| Institution: | CHEN Huan-ran,HAUNG Qi-lin,YANG Hui,et al.(Department of Neurosurgery,Xinqiao Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400037,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Sema3A-Fc fusion protein eukaryotic expression cell migration |
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