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干扰NaV1.9对RAW264.7细胞增殖、吞噬和迁移的影响
引用本文:罗悦晨,周欣,姬文婕,孙海英,卢芮伊,姜铁民,李玉明. 干扰NaV1.9对RAW264.7细胞增殖、吞噬和迁移的影响[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2013, 29(3): 225-228
作者姓名:罗悦晨  周欣  姬文婕  孙海英  卢芮伊  姜铁民  李玉明
作者单位:1. 天津医科大学研究生院,天津300070;武警后勤学院附属医院心血管病研究所心脏中心,天津300162
2. 武警后勤学院附属医院心血管病研究所心脏中心,天津,300162
3. 武警后勤学院附属医院呼吸与重症医学科,天津,300162
基金项目:国家自然科学基金(81070121,81170238);天津市自然科学基金(09ZCZDSF04200,11JCYBJC12000)
摘    要:
目的 应用RNA干扰技术沉默RAW264.7小鼠巨噬细胞中电压门控性钠通道(VGSCs/NaVs)α亚单位NaV1.9基因,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖活性、吞噬能力和迁移功能的影响.方法 通过LipofectamineTM2000将短发夹RNA(shRNA)干扰质粒转染至RAW264.7细胞,经G418筛选获得稳定细胞株.用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定干扰效率,CCK-8法测定稳定细胞株的增殖活性,流式细胞术检测细胞的细胞周期及吞噬能力,Transwell小室法检测细胞的迁移功能.结果 成功建立稳定干扰NaV1.9的细胞株,RT-PCR法鉴定干扰效率达80%.CCK-8法及流式细胞术结果显示,降低NaV1.9的表达使细胞增殖活性下降(P<0.05);流式细胞术结果显示,抑制NaV1.9的表达使细胞吞噬能力降低(P<0.05);Transwell小室法结果显示,干扰NaV1.9的表达使细胞迁移能力减弱(P<0.05).结论 建立了稳定干扰NaV1.9的RAW264.7细胞株,下调NaV1.9的表达使巨噬细胞增殖活性、吞噬能力和迁移功能显著降低.

关 键 词:NaV1.9  RAW264.7  增殖  吞噬能力  迁移能力

Inhibitory effect of NaV1.9 gene silencing on proliferation,phagocytosis and migration in RAW264.7 cells
LUO Yuechen,ZHOU Xin,JI Wenjie,SUN Haiying,LU Ruiyi,JIANG Tiemin,LI Yuming. Inhibitory effect of NaV1.9 gene silencing on proliferation,phagocytosis and migration in RAW264.7 cells[J]. Chinese journal of cellular and molecular immunology, 2013, 29(3): 225-228
Authors:LUO Yuechen  ZHOU Xin  JI Wenjie  SUN Haiying  LU Ruiyi  JIANG Tiemin  LI Yuming
Affiliation:1Graduate School,Tianjin Medical University,Tianjin 300070;2Institute of Cardiovascular Diseases and Heart Center,3Departments of Respiratory and Critical Care Medicine,Pingjin Hospital,Logistics University of Chinese People’ s Armed Police Forces,Tianjin 300162,China
Abstract:
Keywords:
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