前列地尔对体外培养类缺血再灌注损伤模型视网膜神经节细胞的影响

目的 探讨前列地尔对体外培养类缺血再灌注损伤模型视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)生长的影响及其作用机制.方法 以原代培养SD大鼠RGC为研究对象,将培养的细胞随机分为正常组、模型组、模型+前列地尔组.建立类缺血再灌注损伤模型,模型+前列地尔组在缺血期与再灌注期均加入浓度分别为15 μg·L-1、45 μg·L-1、135 μg·L-1前列地尔.类缺血模型建立后24 h、48 h、72 h应用MTT比色法分别测定各组细胞的吸光度值(A值),确定前列地尔的最佳有效作用浓度与时间；采用荧光定量PCR方法分别测定各组细胞中Bax、Bcl-2的相对表达量.结果 RGC培养48 h后,可见RGC伸出突起,随着培养时间的延长,细胞突起变长,部分细胞突起相互连接.使用抗大鼠Thy-1单克隆抗体对RGC进行细胞免疫组织化学检测,可见RGC胞浆及轴突染成棕黄色.模型建立后24 h、48 h、72 h时,与正常组、模型+前列地尔组比较,模型组A值均明显降低,差异均有统计学意义(均为P ＜0.05)；模型建立后24 h时,模型+45 μg·L-1前列地尔组A值与正常组差异无统计学意义(P＞0.05),而正常组、模型+45 μg·L-1前列地尔组与模型+15 μg· L-1前列地尔组、135 μg· L-1前列地尔组比较,差异均有统计学意义(均为P ＜0.05),模型+15 μg· L-1前列地尔组与模型+ 135μg·L-1前列地尔组组间差异无统计学意义(P＞0.05)；模型建立后48 h、72 h时,正常组、模型+前列地尔组之间A值差异均无统计学意义(均为P＞0.05).正常组Bcl-2的相对表达量为0.999±0.035,模型组为0.657±0.012,模型+45 μg·L-1前列地尔组为1.715±0.016(P ＜0.05)；正常组Bax相对表达量为1.001±0.048,模型组为1.712±0.089,模型+45 μg· L-1前列地尔组为1.508±0.061(P ＜0.05).结论 前列地尔对体外培养类缺血再灌注损伤模型RGC具有保护作用；前列地尔可能通过上调细胞内Bcl-2的表达,同时下调Bax的表达,进而发挥细胞保护作用.

Effects of alprostadil on retinal ganglion cells in vitro induced by ischemia-like-reperfusion