6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2，6-二磷酸酶（PFKFB3）抑制剂3PO对高糖环境下人脐静脉血管内皮细胞新生血管形成的影响

目的　探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2，6-二磷酸酶（6-phosphofructokinase-2/fructose-2，6-bisphosphatase 3，PFKFB3）抑制剂3-（3-吡啶基）-1-（4-吡啶基）-2-丙烯-1-酮［3-（3-pyridinyl）-1-（4-pyridinyl）-2-propen-1-one，3PO］对高糖环境下人脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）增殖、迁移和管腔形成的影响。方法　将传代培养的HUVEC随机分为4组:正常对照组（5.5 mmol·L^-1葡萄糖）、高渗组 （5.5 mmol·L^-1葡萄糖 +24.5 mmol·L^-1甘露醇）、高糖组 （30.0 mmol·L^-1葡萄糖）及高糖+3PO组（30.0 mmol·L^-1葡萄糖+ 10 μmol·L^-1 3PO）。细胞同步化后按分组情况更换相应培养基，继续培养细胞，用于后续实验。采用MTS实验检测细胞增殖率，细胞划痕实验检测细胞迁移率，体外管腔形成实验检测细胞成管情况，实时荧光定量PCR检测PFKFB3 mRNA表达，Western blot检测PFKFB3及ERK蛋白表达情况。结果　与正常对照组相比，高渗组细胞增殖能力降低（均为P<0.05）；24 h高糖组细胞增殖能力无明显升高（P>0.05），48 h高糖组细胞增殖能力升高（P<0.05）。与高糖组相比，高糖+3PO组细胞增殖能力明显被抑制（均为P<0.05）。与正常对照组相比，高渗组细胞迁移率明显升高（均为P<0.05）；24 h高糖组细胞迁移率明显升高（P<0.05），但在48 h高糖组中细胞迁移率升高不明显（P>0.05）。与高糖组相比，高糖+3PO组细胞迁移率明显降低（均为P<0.05）。与正常对照组相比，高渗组及高糖组细胞管腔形成能力均明显减弱（均为P<0.05）。与高糖组相比，高糖+3PO组细胞管腔形成能力减弱（P<0.05）。与正常对照组相比，高渗组PFKFB3 mRNA的表达水平变化不大（P>0.05），高糖组PFKFB3 mRNA的表达升高 （P<0.05）。与高糖组相比，高糖+3PO组 PFKFB3 mRNA的表达明显降低（P<0.05）。与正常对照组相比，高渗组及高糖组中p-ERK/ERK蛋白比值及PFKFB3蛋白表达均升高（均为P<0.05）。与高糖组相比，高糖+3PO组p-ERK /ERK蛋白比值及PFKFB3蛋白表达下降（均为P<0.05）。结论　PFKFB3抑制剂3PO可明显降低高糖环境下HUVEC的增殖、迁移和管腔形成的能力，其作用机制可能与MAPK/ERK信号通路有关。