| H-2K~d四聚体的制备及其在检测特异性同种CTLs中的应用 |
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| 引用本文： | 陈雪玲,严永祥,唐婕,翁秀芳,吴雄文.H-2K~d四聚体的制备及其在检测特异性同种CTLs中的应用[J].免疫学杂志,2011(5):424-427. |
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| 作者姓名： | 陈雪玲 严永祥 唐婕 翁秀芳 吴雄文 |
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| 作者单位： | 石河子大学医学院免疫学教研室;华中科技大学同济医学院免疫学系 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(81060227);石河子大学人才启动基金(RCZX200829) |
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| 摘 要： | 目的制备H-2Kd限制性胰岛GAD抗原肽/H-2Kd四聚体并用于检测相应的特异性同种CTL。方法以原核表达的sH-2Kd-BSP为重链,β2m为轻链,与人工合成的GAD抗原肽在体外利用稀释法进行共折叠复性得到单体。然后在BirA酶作用下对其进行生物素化,通过凝胶过滤层析法纯化生物素化的复合物单体,再与Strep-tavidin-FITC按4∶1比例混合形成四聚体;取Balb/c小鼠(H-2Kd)巨噬细胞加载胰岛GAD抗原肽,作为刺激细胞,取C3H小鼠脾细胞(H-2KK)作为效应细胞,在体外进行混合淋巴细胞培养,以获得针对H-2Kd限制性胰岛GAD抗原肽的特异性同种CTL。结果该四聚体能够与长期混合淋巴细胞培养出的同种特异性T细胞结合。结论成功构建胰岛GAD抗原肽/H-2Kd四聚体,并可用于针对H-2Kd限制性胰岛GAD抗原肽特异性同种CTL的检测。
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| 关 键 词： | GAD抗原肽/H-2Kd四聚体 特异性CTL 同种反应 |
Preparation of GAD/H-2K~d tetramer for specific alloreactive CTLs detection |
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| CHEN Xueling,YAN Yongxiang,TANG Jie,WENG Xiufang,WU Xiongwen.Preparation of GAD/H-2K~d tetramer for specific alloreactive CTLs detection[J].Immunological Journal,2011(5):424-427. |
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| Authors: | CHEN Xueling YAN Yongxiang TANG Jie WENG Xiufang WU Xiongwen |
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| Institution: | Department of Immunology,Medical College,Shihezi University,Shihezi 832002,China |
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