| 人乳头瘤病毒16型 E6蛋白真核表达载体pGADT7-E6的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 周艺,王鑫,朱翠明,蒋永林,粟盛梅,尹卫国,万艳平.人乳头瘤病毒16型 E6蛋白真核表达载体pGADT7-E6的构建与鉴定[J].南华大学学报(医学版),2007,35(1):1-3. |
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| 作者姓名： | 周艺 王鑫 朱翠明 蒋永林 粟盛梅 尹卫国 万艳平 |
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| 作者单位： | 1. 南华大学,病原生物学研究所,湖南,衡阳,421001;南华大学,公共卫生学院
2. 南华大学,病原生物学研究所,湖南,衡阳,421001 |
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| 摘 要： | 目的 构建HPV16 E6基因的真核表达载体,为在酵母菌中表达以及进一步探讨HPV16 E6基因与宫颈癌发生的关系奠定前期实验基础.方法 用PCR扩增含EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点的E6基因序列,双酶切pGADT7载体与E6基因PCR产物,纯化回收后,用连接酶将二者连接并转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆,并对其进行双酶切和测序鉴定,构建HPV16 E6基因的真核表达载体pGADT7-E6.结果 双酶切pGADT7-E6后,琼脂糖凝胶电泳显示2个片段,分别在约500 bp与8.0 kb处.DNA测序结果经与GenBank登录的序列做BLAST分析,显示重组质粒含有477 bp的目的 基因片段,读码框正确,无碱基错配和移码突变.结论 成功构建了HPV16 E6基因真核表达载体pGADT7-E6.
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| 关 键 词： | 人乳头瘤病毒 E6基因 E6蛋白 人乳头瘤 病毒 蛋白 基因真核表达载体 构建与鉴定 Protein Eukaryotic Expression Vector Identification 移码突变 碱基错配 框正 读码 基因片段 重组质粒 电泳显示 分析 BLAST 序列 GenBank 测序鉴定 |
| 文章编号： | 1672-7444（2007）01-0001-03 |
| 收稿时间： | 2006-11-08 |
| 修稿时间： | 2006年11月8日 |
Construction and Identification of Eukaryotic Expression Vector pGADT7-E6 of HPV16 E6 Protein |
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| ZHOU Yi,WANG Xi,ZHU Cui - ming,et al.Construction and Identification of Eukaryotic Expression Vector pGADT7-E6 of HPV16 E6 Protein[J].Journal of Nanhua University(Medical Edition),2007,35(1):1-3. |
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| Authors: | ZHOU Yi WANG Xi ZHU Cui - ming |
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| Institution: | Institute of Pathogenic Biology, Nanhua University, Hengyang , Hunan 421001, China |
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| Abstract: | Objective To construct the eukaryotic expression vector of E6 gene of HPV16 for expressing in the yeast and exploring the contribution of E6 gene to the uterine cervix cancer. Methods E6 gene with EcoR I and BamH I endoenzyrne sites was amplified by PCR, and cloned into pGADT7 vector. The positive clones were analyzed by endonuclease restriction digestion and sequencing. Results A BLAST search confirmed that the cloned fragment contained the complete open reading frame of E6 gene of HPV16. Conclusion Eukaryotic expression vector of E6 gene of HPV16 was constructed successfully. |
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| Keywords: | HPV E6 gene E6 protein |
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