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真核荧光蛋白表达载体 pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1的构建与表达
引用本文:艾敏,张巧,赵国强,杨胜利. 真核荧光蛋白表达载体 pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1的构建与表达[J]. 郑州大学学报(医学版), 2008, 43(5)
作者姓名:艾敏  张巧  赵国强  杨胜利
作者单位:郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室,郑州,450001;郑州大学公共卫生学院卫生毒理学教研室,郑州,450001;郑州大学基础医学院食管癌研究室,郑州,450001
摘    要:目的:构建表达B7.2和MAGE-1的绿色荧光共表达载体pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1,并在真核细胞中表达.方法:根据GenBank中的序列,对B7.2、MAGE-1各设计一对两端带有特定限制性酶切位点的引物,分别从乳腺组织、乳癌组织提取总RNA,进行RT-PCR后,将两扩增产物分别克隆在pGEM-T载体,经测序证实碱基序列无误后,双酶切pGEM-T载体,回收目的片段,将两目的片段亚克隆至真核绿色荧光蛋白共表达载体(pEGFP-C3)上,并转染真核细胞,观察其在真核细胞中表达.结果及结论:pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1真核表达载体经酶切及基因序列分析验证,PCR扩增片段与选择的目的片段序列相符,pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1真核表达载体构建成功.该表达载体转染EC9706细胞后,用免疫荧光显微镜观察和RT-PCR分析,该重组载体能够在真核细胞中广泛表达.

关 键 词:B7.2  MAGE-1  真核表达载体  肿瘤免疫

Construction and expression of eukaryotic fluorescent protein expression vector pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1
AI Min,ZHANG Qiao,ZHAO Guoqiang,YANG Shengli. Construction and expression of eukaryotic fluorescent protein expression vector pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1[J]. Journal of Zhengzhou University: Med Sci, 2008, 43(5)
Authors:AI Min  ZHANG Qiao  ZHAO Guoqiang  YANG Shengli
Abstract:
Keywords:B7.2  MAGE-1
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