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疏风宣肺方与解表清里方对流感病毒H_1N_1感染的A549细胞凋亡的影响
作者姓名:葛世杰  刘晓婷  张沂  卢娜娜  顾立刚  吴珺  邱泽计  张洪春  晁恩祥
作者单位:1. 北京中医药大学基础医学院中医药抗病毒重点实验室,北京,100029
2. 北京中日友好医院
基金项目:国家自然科学基金资助项目(编号81173371)。
摘    要:目的:探讨疏风宣肺方与解表清里方对流感病毒H1N1感染的A549细胞凋亡的影响。方法:培养人肺腺癌上皮细胞A549,甲型流感病毒H1N1感染A549细胞后,以达菲为药物对照组,利用基因芯片技术通过KEGG pat hway分析涉及细胞凋亡信号传导途径。研究疏风宣肺方与解表清里方凋亡信号通路中基因转录的变化;同时采用荧光定量PCR检测各组细胞中的肿瘤坏死因子受体超家族成员6(Fas)、Fas配体(Fas L)及天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白-3、-8、-9(Caspase-3、-8、-9)m RNA表达的变化;West er n bl ot t i ng法检测各组细胞中蛋白的变化。结果:与细胞对照组相比,H1N1感染组差异表达基因Casp3、Casp8、Casp9、Fas、Fasl明显上调,奥司他韦组、疏风宣肺组和解表清里组对差异表达基因Casp8、Casp7、Fas、Fasl明显下调;q RT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,H1N1感染组Caspase-3、-8、-9、Fas、Fas L的m RNA表达均显著升高(P0.01);与H1N1感染组比较,疏风宣肺组Caspase-3、-8、-9、Fas、Fas L的m RNA表达均明显降低(P0.05),解表清里组Caspas e-3、-9、Fas、Fas L的m RNA表达均明显降低(P0.05)。同时疏风宣肺组治疗效果优于解表清里组。Wes t er n bl ot t i ng结果显示,H1N1感染组Fas、Fas L蛋白细胞较对照组显著升高(P0.05)。与H1N1感染组比较,2种方药的Fas、Fas L表达均显著降低(P0.05);q RT-PCR结果与基因芯片结果基本一致。结论:疏风宣肺方与解表清里方均可调控甲型流感病毒感染后的Caspase-3、-8、-9、Fas、Fas L表达,可对抗流感病毒感染后的细胞凋亡。

关 键 词:流感病毒  人肺腺癌A549细胞  细胞凋亡  疏风宣肺方  解表清里方
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