戊型肝炎病毒结构区OFR2基因在毕赤酵母中的分泌型表达 |
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引用本文: | 张春江,沈心亮,雷清,李启民. 戊型肝炎病毒结构区OFR2基因在毕赤酵母中的分泌型表达[J]. 药物生物技术, 2002, 9(4): 200-204 |
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作者姓名: | 张春江 沈心亮 雷清 李启民 |
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作者单位: | 1. 兰州大学生命科学学院,兰州,730000 2. 兰州生物制品研究所,兰州,730046 |
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摘 要: | 为寻求新型表达系统来研制戊型肝炎基因工程疫苗,利用甲醇营养型酵母Pichia pastoris表达系统表达戊型肝炎病毒(HEV)结构区ORF2 1.3kb基因。对构建的酵母分泌型表达载体pHIL-S1/HEV和pPIC9/HEV重组体,酶切线性化后转化入GS115酵母菌,经表型鉴定,PCR扩增筛选阳性克隆,对不同表型,不同表达载体的重组株用含甲醇的培养基诱导表达,ELISA及SDS-PAGE筛选表达活性菌株,Western-blot证实表达蛋白与HEVORF2单克隆抗体有特异性反应。得到有效表达HEVORF2蛋白的菌株并初步优化表达条件。
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关 键 词: | 戊型肝炎病毒 结构区 OFR2基因 毕赤酵母 分泌型表达 |
文章编号: | 1005-8915(2002)04-0200-05 |
Secreted Expression of Hepatitis E Virus ORF2 Gene in Pichia Pastoris |
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