人工合成多肽cSN50.1对肝癌细胞HepG2恶性行为的影响及其机制

目的 探讨cSN50.1对HepG2细胞增殖、迁移、侵袭和集落形成能力的影响及机制.方法 将HepG2细胞分为6组:cSN50.1 0 µmol/L、10 µmol/L、30 µmol/L、50 µmol/L、70 µmol/L、90 µmol/L组,采用CCK-8实验研究不同浓度cSN50.1对HepG2细胞增殖的影响,并计算半数抑制浓度(IC50);将HepG2细胞分为4组:cSN50.1 0 µmol/L、10 µmol/L、30 µmol/L、50 µmol/L,采用细胞划痕、Transwell和细胞克隆实验研究不同浓度cSN50.1对HepG2细胞迁移、侵袭和集落形成能力的影响;将HepG2细胞分为3组:Control组、SP600125组(AP-1信号通路抑制剂)和cSN50.1组,研究AP-1信号通路在cSN50.1对肝癌细胞作用中的影响,采用RT-PCR和Western Blot检测CXCL5和TNF-α的表达以及细胞质和细胞核中c-Jun蛋白的表达;将HepG2细胞分为3组:Control组、PDTC组(NF-κB信号通路抑制剂)和cSN50.1组,研究NF-κB信号通路在cSN50.1对肝癌细胞作用中的影响,采用RT-PCR和Western Blot检测CXCL5和TNF-α的表达以及细胞质和细胞核中NF-κB蛋白的表达.多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验.结果 与0 µmol/L相比,10 µmol/L组的增殖、迁移、侵袭和集落形成能力无明显变化(P值均>0.05);30 µmol/L组的增殖能力无明显变化(P>0.05),迁移、侵袭和集落形成能力均明显降低(P值均<0.05);50 µmol/L组的增殖、迁移、侵袭和集落形成能力均明显降低(P值均<0.01);70 µmol/L和90 µmol/L组的细胞增殖能力均明显降低(P值均<0.01),但细胞存活率低于50%.与Control组相比,SP600125组、PDTC组和cSN50.1组中CXCL5和TNF-α的基因和蛋白表达均明显降低(P值均<0.05).与Control组相比,SP600125组、PDTC组和cSN50.1组中细胞核蛋白c-Jun和NF-κB表达均明显降低(P值均<0.05),SP600125组和PDTC组中细胞质蛋白c-Jun和NF-κB表达均明显降低(P值均<0.05),cSN50.1组中细胞质蛋白c-Jun和NF-κB表达明显增高(P<0.05).结论 cSN50.1可以抑制肝癌细胞的恶性行为,可抑制肝癌细胞中c-Jun和NF-κB的入核转运来降低CXCL5和TNF-α的表达.