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利用慢病毒载体系统构建稳定表达癌基因PIN1的鼻咽上皮细胞株
引用本文:李五一,;徐萌,;刘建国,;罗国炜. 利用慢病毒载体系统构建稳定表达癌基因PIN1的鼻咽上皮细胞株[J]. 遵义医学院学报, 2014, 0(6): 612-615
作者姓名:李五一,  徐萌,  刘建国,  罗国炜
作者单位:[1]遵义医学院附属第五医院口腔科,广东珠海519125; [2]遵义医学院珠海校区口腔系,广东珠海519041; [3]遵义医学院口腔学院,贵州遵义563099; [4]贵州省高等学校口腔疾病研究特色重点实验室,贵州遵义563099; [5]香港中文大学病理解剖及细胞学系,威尔斯亲王医院,华南国家肿瘤重点实验室,香港999077
基金项目:贵州省科技创新人才团队建设项目(NO:黔科合人才团队[2013]4026); 遵义医学院博士启动基金项目(NO:F664)
摘    要:
目的利用慢病毒载体系统构建稳定表达癌基因肽脯氨酰异构酶PIN1的鼻咽上皮细胞株,用于后续生物学功能方面研究。方法将病毒载体p CDH-PIN1用Lipofectamine转染到293TN细胞,收集含有PIN1病毒颗粒的培养液加入NP69细胞进行培养。荧光显微镜观察慢病毒载体GFP发光率、RT-q PCR、Westernblot验证PIN1的表达情况。结果荧光显微镜观察发现PIN1基因已整合到94%±2.09%的NP69细胞中,转染效果稳定。RT-q PCR、Westernblot检测发现NP69-PIN1组中PIN1的mRNA和蛋白水平明显高于对照组和空白组。结论课题组利用慢病毒载体系统成功在鼻咽上皮细胞构建PIN1过表达株。

关 键 词:慢病毒载体  PIN1  NP69细胞  鼻咽癌

Establishment of the stable PIN1-over-expressed cell lines in NP69 cells by letiviral system
Affiliation:Li Wuyi,Xu Meng,Liu Jianguo,Luo guowei (1. Department of Stomatology The Fifth Affiliated Hospital of Zunyi Medical University, Zhuihai Guangdong 519125, China; 2. Department of Stomatology, The Zhuhai Campus of Zunyi Medical University, Zhuihai Guangdong 519041, China; 3. The School of Stomatoloy,Zunyi Medical University, Zunyi Guizhou 563099, China; 4. Special Key Laboratory of Oral Diseases Research of Higher Education Institution In GuiZhou Province, Zunyi Guizhou 563099, China ; 5. Department of Anatomical and Cellular Pathology, State Key Laboratory in Oncology in South China, Prince of Wales Hospital, The Chinese University of Hong Kong,Hong kong 999077 ,China)
Abstract:
Keywords:Lentiviral vector  PIN1  NP69 cell  nasopharyngeal carcinoma
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