日本血吸虫抗独特型抗体NP30重链6×CDR3/IL-2融合基因构建及表达 |
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作者姓名: | 徐玮 冯振卿 朱进 仇镇宁 李芸茜 江汕 管晓虹 |
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作者单位: | 南京医科大学病理学与病理生理学系,江苏,南京,210029;南京军区军事医学研究所,江苏,南京,210002;南京医科大学医学分子生物学研究所,江苏,南京,210029 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(39970670) |
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摘 要: | 目的:构建日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30重链可变区6×CDR3基因/IL-2融合基因,以观察其对动物的抗血吸虫感染保护作用。方法:通过PCR方法体外扩增NP30 6×V_HCDR3和IL-2基因,经测序后先后重组入原核表达质粒pET-28a(+)相应的位点上,将构建正确的6×V_HCDR3/IL-2-pET-28a(+)表达质粒转化E.coli BL21,IPTG诱导表达。结果:构建的6×V_HCDR3/IL-2融合基因中,6×V_HCDR3和IL-2序列均正确,融合基因经IPTG诱导表达重组蛋白,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析分子质量约为30ku,表达量约占菌体总蛋白的20%。结论:成功构建并原核表达了NP30 6×V_HCDR3/IL-2融合基因。
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关 键 词: | 日本血吸虫 融合基因 抗体 抗独特型 白细胞介素-2 |
文章编号: | 1007-4368(2003)04-0299-03 |
修稿时间: | 2002-11-27 |
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