| 藻酸钠凝胶三维培养条件下胰岛素样生长因子Ⅰ对兔关节软骨细胞表型的影响 |
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| 引用本文： | 吴剑宏,王秋根,张秋林,唐昊,汤旭日,汪方,邓迎生,谢杨,官正茂,王谦,杨常委.藻酸钠凝胶三维培养条件下胰岛素样生长因子Ⅰ对兔关节软骨细胞表型的影响[J].中国组织工程研究与临床康复,2007,11(19):3704-3707. |
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| 作者姓名： | 吴剑宏 王秋根 张秋林 唐昊 汤旭日 汪方 邓迎生 谢杨 官正茂 王谦 杨常委 |
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| 作者单位： | 1. 解放军第二军医大学长海医院骨科,上海市,200433
2. 上海交通大学附属第一人民医院骨科,上海市,200080 |
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| 基金项目： | 上海市科委科技攻关重点基金 |
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| 摘 要： | 目的:观察胰岛素样生长因子Ⅰ对藻酸盐凝胶三维培养条件下兔关节软骨细胞表型的影响。方法:实验于2004-10/2006-10在上海长海医院血管外科实验室完成。实验材料:4周龄雄性新西兰兔6只。实验方法:利用机械与酶消化的方法获得均一的兔关节软骨细胞,在单层培养条件下将软骨细胞增殖至P2代;将P2代细胞高密度条件下转入藻酸盐凝胶培养介质,进行三维培养。细胞培养分组:①不含胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养。②含50μg/L胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养组。③单层培养。实验评估:①三维培养细胞于培养的2,4,6周行冰冻切片苏木精-伊红染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学检测。②单层培养细胞每传代1次行细胞爬片苏木精-伊红染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学检测。结果:①细胞学外观形态变化:两组藻酸盐凝胶三维培养体系中的软骨细胞在6周的培养过程中始终保持了圆形的细胞外观。单层培养软骨细胞在第5代以前,均保持了星形及多角形的正常软骨细胞外观。②免疫组织化学显示结果:培养6周后,含胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养软骨细胞特异性Ⅱ型胶原细胞仍呈强阳性染色,表达水平较转入三维体系前未见降低,培养细胞保持了良好的分化表型。单层培养软骨细胞在第5代以前,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色为阳性。第6代以后,大部分细胞呈梭形,向成纤维细胞转化,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色为阴性。结论:胰岛素样生长因子Ⅰ对藻酸盐三维培养条件下的关节软骨细胞表型具有维持作用。
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| 关 键 词： | 胰岛素样生长因子Ⅰ 关节 软骨细胞 细胞培养 藻酸盐 组织构建 |
| 文章编号： | 1673-8225（2007）19-03704-04 |
| 修稿时间： | 2006-10-122007-01-03 |
Influence of insulin-like growth factor-Ⅰ on the phenotype of three dimensional cultured articular chondrocytes in rabbits |
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| Wu JH,Wang QG,Zhang QL,Tang H,Tang XR,Wang F,Deng YS,Xie Y,Guan ZM,Wang Q,Yang CW.Influence of insulin-like growth factor-Ⅰ on the phenotype of three dimensional cultured articular chondrocytes in rabbits[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2007,11(19):3704-3707. |
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| Authors: | Wu JH Wang QG Zhang QL Tang H Tang XR Wang F Deng YS Xie Y Guan ZM Wang Q Yang CW |
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