实时荧光定量聚合酶链反应动态监测慢性粒细胞白血病治疗后微小残留病的研究

 【摘要】 目的 建立慢性粒细胞白血病（CML）实时荧光定量聚合酶链反应（RQ-PCR）检测方法，并研究应用此方法检测CML治疗后微小残留病（MRD）对评价MRD的意义。方法 应用RQ-PCR对80例CML患者初诊时和（或）治疗后的骨髓标本进行分析，检测bcr-abl融合基因的转录水平，回顾性分析临床资料，根据治疗方案不同分为异基因造血干细胞移植组（34例）、甲磺酸伊马替尼组（33例）、羟基脲组（13例）为，监测CML患者治疗前后bcr-abl融合基因变化。结果　RQ-PCR检测初诊CML患者bcr-abl阳性平均值为6847.67拷贝／万个细胞，加速期检测平均值为306 176.08拷贝／万个细胞；异基因造血干细胞移植组移植后1个月检测平均值为944.33拷贝／万个细胞，移植后6个月复测平均值2.37拷贝／万个细胞，移植后12个月复测平均值0.29拷贝／万个细胞，移植后24个月检测不到bcr-abl融合基因；甲磺酸伊马替尼组服用3个月后检测平均值3720.23拷贝／万个细胞，服用12个月＜0.10拷贝／万个细胞；羟基脲组用药0个月平均值7290.11拷贝／万个细胞，服用9个月后检测平均值3143.24拷贝／万个细胞。基因造血干细胞移植组、甲磺酸伊马替尼组相同时间bcr-abl水平差异无统计学意义（t＝1.74，P＝0.17），羟基脲组与前两组间比较差异有统计学意义（t＝3.74.P＝0.01；t＝2.97，P＝0.02）。疾病进展时可检测到bcr-abl转录水平的上升；加速期患者的转录本水平明显高于慢性期患者。结论 RQ-PCR作为CML治疗后MRD检测的方法，可以评价治疗效果，预测疾病复发，早期给予干预治疗，有重要临床应用价值。

Real-time quantitative PCR monitoring of minimal residual disease in CML after treatment