腹腔注射中药环维黄杨星D后高血压脑缺血再灌注大鼠生长相关蛋白43mRNA的表达

背景：生长相关蛋白43是一种与轴突生长相关的蛋白，在促进神经发育、轴突再生、突触生长、结构与功能重建等方面起关键作用；研究发现中药环维黄杨星D对实验性脑缺血再灌注大鼠脑损伤有一定保护作用。目的：观察高血压脑缺血再灌注大鼠生长相关蛋白43 mRNA表达情况及中药环维黄杨星D的影响。设计：随机对照动物实验。单位：佛山市中医院，广东省中医院中心实验室。材料：环维黄杨星D是从中药黄杨宁中提取的生物碱单体，环维黄杨星D粉剂由南京小营药制药厂生产提供，国家中药保护品种号ZYB20796057。SD大鼠120只，清洁级雄性，鼠龄两三个月，体质量90～120g。方法：实验于2005-06／2006-03在佛山市中医院、广东省中医院中心实验室完成。①双肾双夹法建立易卒中型肾血管性高血压大鼠模型，120只大鼠随机分为不施任何处理的肾血管性高血压大鼠空白组20只、仅作手术创伤的假手术组20只、脑缺血再灌注模型组40只和环维黄杨星D治疗组40只。②线栓法复制一侧大脑中脉闭塞脑缺血-再灌注模型，环维黄杨星D治疗组在缺血2h再灌注后分别每天腹腔注射环维黄杨星D6．48mg/kg加生理盐水1．5mL，2次／d；对照组中的各小组则同步腹腔注射生理盐水2mL／次，用法同治疗组；各组每天两次注射时间相隔7h。各组分别在缺血再灌注第1，7，14，30d处死。③制作脑片，用原位杂交检测不同时间点各组大鼠脑生长相关蛋白43 mRNA表达。主要观察指标：①脑缺血再灌注2h后，缺血区周围生长相关蛋白43 mRNA表达情况。②脑缺血再灌注2h后海马区生长相关蛋白43 mRNA表达。结果：120只大鼠全部进入结果分析。①生长相关蛋白43 mRNA免疫原位杂交结果：各组大鼠脑内海马结构，可以检测到表达较弱的生长相关蛋白43 mRNA的阳性细胞，脑缺血再灌注后血肿周围缺血半暗区表达丘脑生长相关蛋白43 mRNA的阳性表达细胞。②脑缺血再灌注后血肿周围生长相关蛋白43 mRNA表达情况：在空白组、假手术组未见阳性细胞；缺血再灌注后模型组1d出现血肿周围缺血半暗区生长相关蛋白43 mRNA阳性细胞，7d明显增多，14d逐渐减少，30d仍有表达但明显减少，各时问点表达差异有显著性（P〈0．01）；环维黄杨星D治疗组血肿周围生长相关蛋白43 mRNA阳性表达细胞在各时间点较模型组多，差异有显著性（P〈0．05）。③脑缺血再灌注后大鼠海马区生长相关蛋白43 mRNA表达情况：空白组与假手术组比较差异无显著性；模型组自造模后，1d可见海马区较多的生长相关蛋白43 mRNA阳性细胞，7d达到高峰，14d后逐渐下降．30d表达明显减少，但仍较假手术组明显多；环维黄杨星D治疗组海马区生长相关蛋白43 mRNA阳性细胞在各个时间点均比模型组多，差异有显著性（P〈0．01）。结论：环维黄杨星D上调实验性脑缺血再灌注大鼠脑生长相关蛋白43 mRNA的表达，可能与促进轴突的再生有关。

Effect of intraperitoneal injection of cyclovirobuxine D on the expression of growth-associated protein-43 mRNA in hypertensive rats with cerebral ischemia reperfusion