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不同浓度雌二醇对骨髓基质细胞分化过程中Cbfa1和PPAR-γ2 mRNA表达的影响
作者姓名:金小岚  袁成良  侯建红  钱江龙  黄迎春
作者单位:[1]解放军成都军区总医院内分泌科,四川省成都市610038 [2]解放军成都军区总医院神经外科,四川省成都市610038 [3]解放军成都军区总医院检验科,四川省成都市610038 [4]成都百奥生物技术有限公司,四川省成都市610026
摘    要:
背量:绝经后骨质疏松的病理生理机制尚未完全阐明,研究表明骨丢失与雌激素缺乏相关,后者可导致多种细胞因子生成增加,继而引起成骨细胞和破骨细胞生成增多。骨吸收增强。雌二醇能否改变骨髓基质细胞分化过程中Cbfa1和PPAR-γ2 mRNA的表达进而影响其向成骨细胞分化尚不清楚。目的:研究骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的介质中,17β-雌二醇对其核结合因子a1(Cbfa1)及过氧化物酶增殖活化受体γ2(PPAR-γ2)mRNA表达的影响,探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用。设计:非随机对照研究。地点和对象:所有实验均在成都军区总医院检验科和成都百奥生物技术有限公司完成,分离骨髓基质细胞所需大鼠由成都中医药大学实验动物研究中心提供。干预:1,25(OH)2D3和地塞米松诱导大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化,用不同浓度[(O-1)&;#215;10^-6mol/L]雌二醇对细胞分化过程进行干预。主要观察指标:应用半定量RT-PCR及Northern blot技术,观察不同浓度雌二醇对骨髓基质细胞分化过程中Cbfa1及PPAR-γ2 mRNA表达的影响。结果:雌二醇能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中Cbfa1 mRNA的表达,雌二醇浓度为[(O-1)&;#215;10^-6mol/L]时,Cbfa1 mRNA的表达量从(25.0&;#177;3.3)%降至(19.8&;#177;2.2)%(t=2.62,P&;lt;0.05),(14.5&;#177;1.3)%(t=5.92,P&;lt;0.01)和(6.5&;#177;1.9)%(t=9.72,P&;lt;0.01);雌二醇能明显促进骨髓基质细胞在分化介质中PPAR-γ2 mRNA的表达,在上述雌二醇浓度时。PPAR-γ2 mRNA的表达从(1.75&;#177;0.5)%增至(9.5&;#177;2.1)%(t=7.18,P&;lt;0.01)和(19.3&;#177;3.0)%(t=11.5,P&;lt;0.01);Northern blot结果显示随着雌二醇浓度的增加,Cbfa1 mRNA的表达量从4.42&;#177;0.39降至1.88&;#177;0.16(t=12.0,P&;lt;0.01)和1.19&;#177;0.11(t=15.8,P&;lt;0.01);PPAR-γ2 mRNA的表达量从1.31&;#177;0.12增至2.81&;#177;0.22(t=10.5,P&;lt;0.01)和4.02&;#177;0.36(t=14.2,P&;lt;0.01)。细胞ALP活性明显受雌二醇的抑制,在上述雌二醇浓度时ALP的活性从(42.6&;#177;2.5)降至(3.6&;#177;0.7)U/g蛋白(t=29,P&;lt;0.01)。Ⅰ型胶原含量均随雌二醇浓度增加而降低。结论:雌二醇抑制体外培养的骨髓基质细胞向成骨细胞分化而促进其向脂肪细胞分化。

关 键 词:雌二醇/药理学 基因表达 骨髓基质细胞
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