白色念珠菌烯醇化酶抗原双抗体夹心法的建立及应用

目的 建立定量检测白色念珠菌烯醇化酶抗原的双抗体夹心法，为后续定量检测念珠菌性阴道炎患者阴道分泌物中的烯醇化酶抗原提供方法学基础。方法 用方阵滴定法确定最佳包被抗体浓度和最佳酶标二抗浓度，建立检测白色念珠菌烯醇化酶抗原的ELISA法，用该法检测白色念珠菌标准菌株SC5314培养上清中烯醇化酶抗原的浓度，初步探索应用于诊断外阴阴道念珠菌病。结果 最佳包被抗Eno单抗浓度为4.15μg/mL；酶标二抗HRP标记的抗烯醇化酶多抗最佳稀释倍数为1∶1 000。在第12小时时白色念珠菌培养上清中的烯醇化酶抗原开始检出，随着培养时间的延长，其上清中Eno抗原的浓度也随着逐渐增高，第48小时时达到峰值后趋于稳定。阴道分泌物上清中烯醇化酶抗原浓度随着真菌培养菌落计数的增加其浓度也在增加，有很好的相关性。结论 成功建立了定量检测白色念珠菌烯醇化酶抗原的双抗体夹心ELISA方法，可应用于评价念珠菌性阴道炎患者阴道分泌物中的烯醇化酶抗原的水平。