| CD19和CD22双靶点CAR-T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用 |
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| 作者姓名： | 李薇 曾伟杰 彭浩 刘灿 刘广花 肖非笛 曾桂芳 梁晓 蔡车国 胡隽源 周明 |
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| 作者单位： | 1. 湖南省人民医院（湖南 师范大学附属第一医院）血液内科,湖南 长沙 410005;2. 深圳市北科生物科技有限公司,广东 深圳 518057 |
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| 基金项目： | 湖南省自然科学基金资助项目（No.2020JJ4403）;湖南省社会发展重点研发项目（No.2019SK2091） |
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| 摘 要： | 目的：设计并制备一种分别靶向B细胞表面抗原CD19和CD22的CAR-T细胞,检测其对肿瘤细胞的体内外杀伤效果。方法：将含有人源化CD19 Sc Fv的二代CAR分子和带有CD3ε链作为共刺激结构域的CD22 Sc Fv CAR分子以P2A自剪切肽连接,序列连接于慢病毒载体p LTR-CMV-MCS中,以HEK-293T细胞包装相应的慢病毒载体,感染健康志愿者提供的T细胞制备CAR-19-22-T细胞,同时以相同二代结构分别构建单靶向CAR-T细胞作为参照。构建表达荧光素酶、CD19和/或CD22的前列腺癌3M细胞（靶细胞）。将各种CAR-T细胞与靶细胞共同培养,采用荧光素酶化学发光法和ELISA法检测其对靶细胞的杀伤能力和细胞因子的分泌水平。通过尾静脉注射Raji-Luc细胞构建NOD-SCID免疫缺陷小鼠白血病模型,分别注射各组CAR-T细胞进行治疗并评估其疗效。结果：培养7 d的CAR-19-22-T细胞的CAR-19表达率为13.7%,CAR-22表达率为14.3%。CAR-19-22-T细胞在10∶1效靶比时,对3M-CD19-Luc、3M-CD22-Luc和3M-CD19-...
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| 关 键 词： | CD19 CD22 双靶点CAR-T细胞 淋巴细胞白血病 靶向治疗 |
| 收稿时间： | 2022-03-17 |
| 修稿时间： | 2022-05-07 |
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