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树突状细胞与尤文肉瘤细胞融合诱导肿瘤免疫应答的体外研究
引用本文:唐顺,郭卫,郭义,曲华毅,李大森.树突状细胞与尤文肉瘤细胞融合诱导肿瘤免疫应答的体外研究[J].中华外科杂志,2005,43(12):803-806.
作者姓名:唐顺  郭卫  郭义  曲华毅  李大森
作者单位:100044,北京大学人民医院骨与软组织肿瘤治疗中心
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30371432)
摘    要:目的检测尤文肉瘤细胞A673和树突细胞(DC)融合构建的肿瘤疫苗对尤文肉瘤细胞株A673 的杀伤作用.方法应用促融合剂PEG对尤文肉瘤A673细胞和从外周血单个核细胞(PBMC)诱生的树突细胞进行融合.利用细胞因子hGM-CSF和hIL-4从 PBMC诱生DC,并对其表型进行流式细胞仪(FCM) 分析,红色荧光染料PKH-26标记A673细胞,绿色荧光染料PKH-67标记DC,应用促融合剂PEG融合后光镜及电镜观察DC细胞和融合细胞形态,FCM检测融合效率,通过同种混合淋巴细胞反应检测其免疫刺激活性.通过IFN-γ ELISA法产生细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的量,通过51Cr细胞杀伤试验检测融合细胞对A673 细胞的杀伤作用.结果 FCM检测出从PBMC 成功诱生出CD83、CD80、CD86 及HLA-DR 高表达的成熟DC.DCs/A673融合细胞的融合效率达到23%,同种混合淋巴细胞反应显示DCs/A673融合细胞有很强的免疫刺激活性.IFN-γ分泌检测显示DCs/A673融合细胞组较对照组产生CTL水平显著增高.51Cr释放法检测融合细胞体外诱导抗原特异的CTL, 融合细胞激活的CTL对肿瘤细胞系A673细胞的杀伤作用强于DC-A673混合组、DC组、A673组的CTL(P<0.05),作用较对照各组显著增强.结论 DC与A673细胞融合体外致敏自体T 淋巴细胞能生成抗原特异CTL 对尤文肉瘤细胞A673 有一定的杀伤作用.

关 键 词:树突细胞    细胞融合    尤文肉瘤    疫苗    抗肿瘤免疫
修稿时间:2005年2月5日

In vitro antitumor immune response induced by fusion of dendritic cells and Ewing's sarcoma cells
TANG Shun,GUO Wei,GUO Yi,QU Hua-yi,LI Da-sen.In vitro antitumor immune response induced by fusion of dendritic cells and Ewing''''s sarcoma cells[J].Chinese Journal of Surgery,2005,43(12):803-806.
Authors:TANG Shun  GUO Wei  GUO Yi  QU Hua-yi  LI Da-sen
Abstract:
Keywords:
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