纳洛酮对蛛网膜下腔出血大鼠海马区神经细胞自噬的影响

目的探讨纳洛酮对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠海马区神经细胞自噬的影响。方法将 108只健康雄性清洁级 SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、 SAH组、纳洛酮组，每组 36只。假手术组只进行造模手术不刺破血管， SAH组利用颈内动脉穿刺法制成大鼠 SAH动物模型，纳洛酮组在造模成功后立即给予纳洛酮(1 mg∕kg体质量)腹腔注射，每 12小时注射 1次，用药至处死的各时相点。假手术组和 SAH组采用同样方法注射同等体积的 0.9%氯化钠溶液。每组又按 6h、24 h、72 h时间点分为 3个亚组(每个亚组 12只 SD大鼠)。穿梭箱实验观察三组大鼠的行为学变化；苏木素 ?伊红(HE)染色观察海马区神经细胞形态变化；免疫组织化学检测自噬特异性标志物 Beclin?1和微管相关蛋白 1轻链 3(LC3?Ⅱ)在大鼠海马区神经细胞的表达。结果与假手术组相比， SAH组 6h、24 h、72 h各时间点逃避反应次数减少［(24.83±3.24)次比(14.41±1.98)次，(25.33±2.64)次比(16.25±2.18)次，(25.16±2.82)次比(18.33±2.57)次］(P＜0.05)，逃避反应时间增加［(3.54±0.99)s比(9.09±1.38)s，(3.55±0.84)s比(8.73±1.13)s，(3.54±0.83)s比(8.00±1.04)s］(P＜0.05)海马区正常神经细胞数量减少［(122.67±5.55)个比(84.25±12.63)个，(122.25±5.50)个比(75.58±11.11)个，(121.58±5.68)个7.75±10.55)个］(P＜0.05)表达 Beclin?1和 LC3?Ⅱ蛋白的阳性细胞数量增高［(20.50±3.45)个比(31.41±4.96)个，(20.33±2.77)个比(47.67±7.35)个，(200±3.59)个比(43.17±6.46)个；(17.08±比(6，.5，3.00)个比(27.42±3.40)个，(17.50±2.31)个比(39.83±4.67)个，(17.41±2.57)个比(31.50±4.06)个］(P＜0.05)。与 SAH组比较，纳洛酮组各时间点逃避反应次数增多［(14.41±1.98)次比(16.50±1.93)次，(16.25±2.18)次比(19.25±2.30)次，(18.33±2.57)次比(22.50±2.20)次］(P＜0.05)，逃避反应时间减少［(9.09±1.38)s比(8.05±1.24)s，(8.73±1.13)s比(6.56±1.09)s，(8.00±1.04)s比(5.36±0.97)s］(P＜0.05)海马区正常神经细胞数量增多［(84.25±12.63)个比(94.75±11.06)个，(75.58±11.11)个比(84.50±9.21)个，(67.75±10.55)个比.33±9.88)个］(P＜0.05)表达 Beclin?1和 LC3?Ⅱ蛋白的阳性细胞数量增高［(31.41±4.96)个比(77，(36.17±4.06)个，(47.67±7.35)个比(57.58±6.68)43.17±6.46)个比(52.75±7.35)个；(27.42±3.40)个比(30.92±4.19)个，个，(，(39.83±4.67)个比(48.33±5.66)个，(31.50±4.06)个比(38.58±5.40)个］(P＜0.05)。结论纳洛酮的干预可适度激活 SAH大鼠海马区神经细胞自噬的表达，并具有脑保护作用。

Effect of naloxone on autophagy in hippocampus of rats with subarachnoid hemorrhage