| 体外重组Cav1.2钙通道CT1蛋白片段制备方法的优化 |
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| 引用本文： | 康泽,邵冬雪,彭羽,苏敬阳,封瑞,孙雪菲,郝丽英. 体外重组Cav1.2钙通道CT1蛋白片段制备方法的优化[J]. 解剖科学进展, 2019, 25(5): 528-531 |
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| 作者姓名： | 康泽 邵冬雪 彭羽 苏敬阳 封瑞 孙雪菲 郝丽英 |
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| 作者单位： | 中国医科大学药学院药物毒理学教研室,沈阳,110122;中国医科大学药学院药物毒理学教研室,沈阳,110122;中国医科大学药学院药物毒理学教研室,沈阳,110122;中国医科大学药学院药物毒理学教研室,沈阳,110122;中国医科大学药学院药物毒理学教研室,沈阳,110122;中国医科大学药学院药物毒理学教研室,沈阳,110122;中国医科大学药学院药物毒理学教研室,沈阳,110122 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | ![]()
目的通过改变多种实验条件提高CaV 1.2钙通道C末端GST融合蛋白(GST-CT1)在大肠杆菌BL21中的表达量及分离纯化产量。方法把pGEX-6p-3/CT1质粒转入大肠杆菌BL21中,筛选其中转化成功的菌株培养并用异丙基硫代半乳糖苷(Isopropylβ-D-Thiogalactoside,IPTG)在不同细菌浓度,不同诱导时间或不同温度下诱导表达GST-CT1蛋白,Glutathione-Sepharose 4B beads(GS-4B beads)纯化蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测蛋白表达水平。结果当吸光度为0.6～1.0时,GST-CT1在大肠杆菌BL21中的表达量较高,IPTG诱导表达蛋白大于4h后无明显表达量差异,并且当诱导温度为25℃时,蛋白的产量将大大增加。结论可以通过控制细菌数量、控制诱导时长和降低诱导温度的方法来提高GST-CT1蛋白的产量。
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| 关 键 词： | 钙通道 融合蛋白 包涵体 蛋白表达 |
Optimization of preparation method of in vitro recombinant Ca_V1.2 calcium channel CT1 fragment |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | |
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