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大鼠脊髓损伤节段线粒体自噬蛋白及凋亡因子的表达
引用本文:周林泉,王振宇,李建东,陈 刚,刘文革.大鼠脊髓损伤节段线粒体自噬蛋白及凋亡因子的表达[J].中国脊柱脊髓杂志,2017(5):435-440.
作者姓名:周林泉  王振宇  李建东  陈 刚  刘文革
作者单位:福建医科大学 350004 福州市,福建医科大学附属协和医院骨科 350000 福州市,福建医科大学附属协和医院骨科 350000 福州市
基金项目:国家自然科学基金面上项目(81371343);国家青年科学基金(81541035)
摘    要:目的 :观察脊髓损伤节段线粒体自噬蛋白与凋亡蛋白的表达情况。方法 :将50只清洁级SD雄性大鼠随机分为损伤组(39只)和对照组(11只),损伤组应用Allen′s法建立大鼠脊髓损伤模型,并分为5个不同时间点(损伤后1h、6h、24h、48h、72h),每个时间点7只,在损伤不同时间点处死大鼠,并截取损伤区域约1cm长脊髓节段,通过Western blot检测线粒体自噬蛋白(LC3、NIX)及凋亡蛋白(BNIP3、cleaved caspase-3、cytochrome c)表达水平;另取4只大鼠在损伤后24h截取损伤组织,用透射电镜观察损伤后神经元自噬体结构。对照组不做任何处理,其中7只大鼠用于Western blot分析,4只用于电镜检测。结果:对照组及损伤后1h、6h、24h、48h、72h脊髓损伤组大鼠LC3表达水平分别为0.2893±0.0325、0.3002±0.0474、0.3943±0.1154、0.4818±0.0426、0.5430±0.0865、0.5790±0.0892;NIX表达分别为0.1392±0.0171、0.1431±0.0325、0.1955±0.1379、0.3841±0.1136、0.4043±0.1059、0.4506±0.0174;BNIP3表达水平分别为0.1354±0.0547、0.1896±0.1264、0.2654±0.1341、0.7220±0.1030、0.4713±0.1041、0.3975±0.1505;cleaved caspase-3表达水平分别为0.2806±0.0999、0.4158±0.1137、0.7865±0.4056、0.9354±0.2659、1.0152±0.3441、1.1608±0.2488;细胞色素C表达水平分别为0.1489±0.0300、0.2196±0.0762、0.3162±0.1656、0.4456±0.1180、0.5407±0.1029、0.5812±0.1388。LC3、NIX、cleaved caspase-3和细胞色素C在24h、48h、72h与对照组比较明显增加(P0.05);BNIP3在24h、48h与对照组比较明显增加(P0.05)。进一步通过透射电镜观察损伤后24h细胞超微结构,可观察到双层膜结构自噬体,其内包裹有受损线粒体等细胞器结构。结论:大鼠急性脊髓损伤后可能通过促进NIX蛋白与LC3结合诱导线粒体自噬,减少凋亡水平,从而在脊髓损伤修复中发挥保护作用。

关 键 词:脊髓损伤  线粒体自噬  凋亡
收稿时间:2016/11/30 0:00:00
修稿时间:2017/3/21 0:00:00

The expression of mitophagy protein and apoptosis factor in spinal cord injury in rats
HOU Linquan,WANG Zhenyu,LI Jiandong.The expression of mitophagy protein and apoptosis factor in spinal cord injury in rats[J].Chinese Journal of Spine and Spinal Cord,2017(5):435-440.
Authors:HOU Linquan  WANG Zhenyu  LI Jiandong
Institution:Fujian Medical University, 350004, Fuzhou, China
Abstract:
Keywords:Spinal cord injury  Mitophagy  Apoptosis
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