巨结肠家系RET基因突变功能研究题录

目的研究巨结肠家系RET基因新发无义突变c.2599G>T是否具有致病功能。方法利用定点突变技术构建RET c.2599G>T突变型过表达腺病毒, 感染人胚肾细胞HEK-293。实验分为4组:未感染组(Control组)、阴性对照腺病毒对照组(NC组)、RET野生型过表达腺病毒组(WT组)、RET c.2599G>T突变型过表达腺病毒组(c.2599G>T组)。利用RT-PCR、蛋白质印迹法、免疫荧光定位、Transwell迁移实验、CCK-8增殖实验、流式细胞凋亡检测技术, 胶质细胞源性神经营养因子(glial-derived neurotrophic factor, GDNF)处理细胞后检测p-RET和p-ERK1/2, 探究突变RET基因的功能。多组均数间比较采用Tukey’’sT检验, 多个研究组均数与对照组均数比较采用Dunnett-T检验。结果 c.2599G>T组不能检测到RET全长蛋白。Transwell检测细胞迁移个数c.2599G>T组(100.80±14.72)较WT组(155.20±7.89)迁移能力下降(P<0.001...