miR-199a-3p靶向Smad1促进小鼠心肌纤维化相关基因的表达 |
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引用本文: | 梁景南,朱文思,张灼,朱杰宁,符永恒,林秋雄,邝素娟,张梦珍,单志新.miR-199a-3p靶向Smad1促进小鼠心肌纤维化相关基因的表达[J].南方医科大学学报,2018,38(10):1203. |
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作者姓名: | 梁景南 朱文思 张灼 朱杰宁 符永恒 林秋雄 邝素娟 张梦珍 单志新 |
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摘 要: | 目的探讨微小RNA-199a-3p(miR-199a-3p)对心肌纤维化的调控作用及其作用靶基因。方法原代分离并体外培养成体
C57BL/6小鼠心肌成纤维细胞;脂质体转染法将miR-199a-3p模拟物和Smad1 siRNA瞬时转染至小鼠心肌成纤维细胞;双荧光
素酶报告基因实验检测miR-199a-3p与潜在靶基因Smad1 3’端非翻译区(3’-UTR)的结合作用;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和
Western blot 法分别检测小鼠心肌成纤维细胞转染miR-199a-3p 后,Smad1 及纤维化相关基因表达。Western blot 检测转染
miR-199a-3p,Smad1 siRNA 后,小鼠心肌成纤维细胞中纤维化相关基因、Smad1 和Smad3 的激活水平。结果RT-qPCR 和
Western blot结果证实在心肌成纤维细胞中过表达miR-199a-3p可以增强纤维化相关基因表达。双荧光素酶报告基因实验显示
miR-199a-3p 与Smad1 3’-UTR有结合作用。RT-qPCR和Western blot 结果证实miR-199a-3p 可在转录水平抑制Smad1 表达。
过表达miR-199a-3p和沉默Smad1均能一致性的通过激活Smad3通路而促进心肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达。结论
miR-199a-3p通过靶向Smad1,从而激活Smad3通路来促进纤维化相关基因表达。
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MicroRNA-199a-3p enhances expressions of fibrosis-associated genes through targeting
Smad1 in mouse cardiac fibroblasts |
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