凝胶过滤层析纯化白喉类毒素工艺的优化

目的  通过定制设计优化白喉类毒素（diphtheria toxoid,DT）层析纯化工艺。方法  将经硫酸铵沉淀的精制DT原液浓缩后分别用Sepharose 4FF （4FF）和Sephacrayl S-300（S-300）凝胶过滤层析进行进一步纯化。根据定制设计,将上样体积、样品浓度、洗脱流速、层析介质设为实验因子,将层析载量、纯度、收率设为响应值,建立数学模型,确定凝胶过滤层析的最优层析参数,并对实验结果进行工艺验证。结果  定制设计的实验结果显示,S-300凝胶过滤层析纯化的DT纯度和收率均高于4FF凝胶过滤层析。进一步分析确定,S-300凝胶过滤层析的最佳参数为：上样体积2.5%,样品浓度45 mg/ml,洗脱流速45 cm/h。当以最佳参数进行S-300凝胶过滤层析纯化时,层析工艺的验证结果符合预期。结论  S-300比4FF更适宜作为DT纯化工艺的凝胶层析介质。