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| 抗Caspase-12核酶的制备与体外活性鉴定 | |
| 引用本文： | 姜山,谢青,张(韦华),周霞秋,俞红,金由辛. 抗Caspase-12核酶的制备与体外活性鉴定[J]. 中华肝脏病杂志, 2005, 13(2): 121-124 |
| 作者姓名： | 姜山 谢青 张(韦华) 周霞秋 俞红 金由辛 |
| 作者单位： | 1. 200025,上海第二医科大学附属瑞金医院感染科 2. 中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(30170850) |
| 摘 要： | 目的 设计针对小鼠内质网应激凋亡途径中caspase-12mRNA的锤头状核酶(Rz138、Rz218)，通过靶基因及核酶的体外转录、切割，进行核酶活性鉴定，评估其应用前景。方法 小鼠Caspase-12基因的逆转录聚合酶链反应(RTPCR)扩增片段克隆于PGEMT载体的T7启动子下游，通过α-^32P UTP标记的体外转录物作为靶RNA。设计合成针对小鼠Caspase-12 mRNA的核酶，通过PCR方法扩增核酶的转录模板，采用非同位素标记法行体外转录，核酶与靶RNA进行体外切割实验。结果在37℃，Rz138、Rz218均有切割活性，Rz138的切割效率较高，几乎100％。结论 Rz138在体外具有良好的特异催化切割活性，它有望通过切割Caspase-12 mRNA而抑制内质网应激介导的细胞凋亡发生。 |
| 关 键 词： | Caspase-12 核酶 RNA 小鼠 抗C 体外活性 内质网应激 T7启动子 体外转录 克隆 |
| 修稿时间： | 2004-02-23 |
Preparation and identification of hammerhead ribozyme in vitro against caspase-12 mRNA fragments |
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| JIANG Shan,XIE Qing,ZHANG Wei,ZHOU Xia-qiu,YU Hong,JIN You-xin. Preparation and identification of hammerhead ribozyme in vitro against caspase-12 mRNA fragments[J]. Chinese journal of hepatology, 2005, 13(2): 121-124 | |
| Authors: | JIANG Shan XIE Qing ZHANG Wei ZHOU Xia-qiu YU Hong JIN You-xin |
| Affiliation: | Department of Infectious Diseases, Ruijin Hospital of Shanghai Second Medical University, Shanghai 200025, China. |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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