| 乳腺癌细胞特异性MGA启动子的扩增及功能分析 |
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| 引用本文： | 李金桥,梁培龙,吴峰,杨超,张洪玉,魏力军,戴钟铨,李莹辉. 乳腺癌细胞特异性MGA启动子的扩增及功能分析[J]. 肿瘤防治研究, 2015, 42(12): 1177-1182. DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2015.12.002 |
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| 作者姓名： | 李金桥 梁培龙 吴峰 杨超 张洪玉 魏力军 戴钟铨 李莹辉 |
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| 作者单位： | 1. 100094 北京，中国航天员科研训练中心，航天医学基础与应用国家重点实验室；2. 150001 哈尔滨，哈尔滨工业大学生命科学与技术学院 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划（973）项目（2011CB707704） |
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| 摘 要： | ![]()
目的 探讨人乳腺球蛋白（mammaglobin A, MGA）基因启动子的乳腺肿瘤细胞特异性和调控元件，并验证MGA启动子载体系统在活体肿瘤组织中的表达活性。方法 PCR扩增5.6 kb大小的人MGA启动子片段，并在此基础上构建四个含有萤火虫荧光素酶报告基因的重组载体；瞬时转染到乳腺癌细胞系T47D和人胚肾细胞系HEK293T后，利用双荧光素酶报告基因体系，检测各个MGA启动子活性；稳定转染MGA重组载体到乳腺癌细胞系T47D（T47DEM），进行裸鼠皮下造瘤，活体成像检测报告基因活性。结果 （1）双增强子的启动子活性低于单增强子启动子（降低82%）；（2）定点删除YY1结合元件后，启动子活性下降76.2%，乳腺肿瘤细胞特异性下降38.4%；（3）定点删除Nkx2.5后，启动子活性没有明显变化，但特异性降低31.9%；（4）细胞株T47DEM在体形成肿瘤后，表现出明显的报告基因活性。结论 研究了两个增强子叠加和两个转录因子结合位点（YY1和Nkx2.5）对MGA启动子活性和特异性的影响；构建的细胞株（T47DEM）可以用于治疗乳腺癌药物的在体筛选。
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| 关 键 词： | 乳腺特异性；MGA启动子；荧光素酶报告基因体系；皮下造瘤；活体成像系统 |
| 收稿时间： | 2015-01-05 |
Amplification and Function of Specific Mammaglobin A Promoter in Breast Cancer Cells |
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| LI Jinqiao,LIANG Peilong,WU Feng,YANG Chao,ZHANG Hongyu,WEI Lijun,DAI Zhongquan,LI Yinghui. Amplification and Function of Specific Mammaglobin A Promoter in Breast Cancer Cells[J]. Cancer Research on Prevention and Treatment, 2015, 42(12): 1177-1182. DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2015.12.002 |
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| Authors: | LI Jinqiao LIANG Peilong WU Feng YANG Chao ZHANG Hongyu WEI Lijun DAI Zhongquan LI Yinghui |
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| Affiliation: | 1. China Astronaut Research and Training Center, State Key Lab of Space Medicine Fundamentals and Application , Beijing 100094, China; 2. School of Life Science and Technology, Harbin Institute of Technology, Harbin 150001, China |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | Breast specificity Mammaglobin A(MGA) promoter Luciferase reporter gene system Subcutaneous tumorigenesis In vivo imaging system(IVIS) |
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