SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测DNA甲基化方法的建立 |
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作者姓名: | 杨晓菲 邱耕 叶松山 丁肖华 欧志英 王伟毅 何蕴韶 |
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作者单位: | 1. 中山大学中山医学院人体解剖学教研室,广州,510080 2. 中山大学达安基因诊断中心 |
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摘 要: | 近期,表观遗传学与肿瘤发生关系的研究日益增多。DNA甲基化是表观遗传学的重要组成部分,并已成为肿瘤早期诊断的研究热点。甲基化特异性PCR(MSP)是检测DNA甲基化的常用方法之一,该方法灵敏度和特异度高,但操作繁琐,难以自动化。TaqMan荧光定量PCR法,即Methylight在MSP的基础上设计1条TaqMan探针,该方法的准确性和检测的灵敏度都很高。然而,因需要设计合成特异的探针而使其的应用受限,而且TaqMan探针昂贵。本研究建立SYBRGreenⅠ荧光定量PCR(FQ—PCR)检测DNA甲基化的方法,通过临床标本检测和对比试验,以证明其与Methylight的检测效能,以便为DNA甲基化检测的临床应用提供工具。
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关 键 词: | 荧光定量PCR检测 DNA甲基化 Green TaqMan探针 SYBR 荧光定量PCR法 肿瘤早期诊断 甲基化特异性 |
收稿时间: | 2006-07-31 |
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