| 荧光定量PCR检测TCR VγI-Jγ基因重排标准品质粒及标准曲线的构建 |
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| 引用本文： | 江小工,徐兵,许文娟,李冰.荧光定量PCR检测TCR VγI-Jγ基因重排标准品质粒及标准曲线的构建[J].实用医学杂志,2004,20(2):115-117. |
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| 作者姓名： | 江小工 徐兵 许文娟 李冰 |
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| 作者单位： | 510515,广州市,第一军医大学南方医院血液科 |
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| 摘 要： | 目的：构建荧光定量PCR检测TCR VγI-Jγ基因标准品重组质粒和标准曲线，为建立实时荧光定量PCR准确检测淋巴系肿瘤微小残留病奠定基础。方法：对TCR VγI-Jγ基因进行序列分析，利用引物设计软件设计出一对引物和一条荧光探针。提取急性淋巴细胞白血病患者的DNA，经PCR扩增，产物纯化后与pMD 18-T Vector连接，转化到大肠杆菌DH5α，筛选得到标准品的质粒。结果：重组质粒进行荧光定量PCR扩增出现强烈的荧光值增长，表明TCR VγI-Jγ基因已成功克隆。以10^0～10^-5不同稀释水平的标准品进行荧光定量PCR扩增，Ct值分别为21．08、24．34、27．53、30．58和33．25。统计学分析显示Ct值与标准品浓度的对数存在良好线性关系，回归系数为0．998。结论：所构建的TCR VγI-Jγ基因荧光定量PCR检测标准品特异性和线性关系好，准确可靠，利于统一标准。
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| 关 键 词： | 荧光定量 PCR检测 TCRVγI-Jγ 基因重排 标准品质粒 标准曲线 |
Construction of recombinant plasmid and standard curve for detection of TCR VγI-Jγ gene rearrangement by real-time quantitative PCR |
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| JIANG Xiao-gong,XU Bing,XU Wen-juan,LI Bing.Construction of recombinant plasmid and standard curve for detection of TCR VγI-Jγ gene rearrangement by real-time quantitative PCR[J].The Journal of Practical Medicine,2004,20(2):115-117. |
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| Authors: | JIANG Xiao-gong XU Bing XU Wen-juan LI Bing |
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| Institution: | JIANG Xiao-gong,XU Bing,XU Wen-juan,LI Bing. Department of hematology,Nanfang Hospital,The first military medical university,Guangzhou 510515,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Polymerase chain reaction Gene rearrangement Plasmid Standard curve |
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