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稳定表达细胞周期蛋白D1反义基因逆转人胃癌细胞恶性表型
引用本文:陈兵,常杭花,彭亦良,刘宝华,刘为纹,房殿春,张学庸,樊代明. 稳定表达细胞周期蛋白D1反义基因逆转人胃癌细胞恶性表型[J]. 第三军医大学学报, 2001, 23(10): 1203-1205
作者姓名:陈兵  常杭花  彭亦良  刘宝华  刘为纹  房殿春  张学庸  樊代明
作者单位:第三军医大学附属西南医院内分泌科,重庆,400038;重庆市第九人民医院胃镜室,重庆,400700;第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所普通外科,重庆,400042;第三军医大学附属西南医院全军消化专科中心,重庆,400038;第四军医大学西京医院全军消化病研究所,西安,700032
基金项目:总后勤部博士后科学基金资助项目 (中博基 [1 998]6号 )
摘    要:目的 探讨细胞周期蛋白D1对肿瘤生物学行为的影响及用于基因治疗的可能。方法 利用重组技术将人细胞周期蛋白D1cDNA全片段克隆至亚克隆载体Bluescript KS中。利用该载体内的T2 /T3成对启动子体系 ,体外转录法制备正、反义细胞周期蛋白D1单链RNA探针。同时利用该载体转换酶切位点的作用 ,构建了人细胞周期蛋白D1反义RNA真核表达载体pDORD1AS ,阳离子脂质体介导下转染胃癌细胞株 ,经G41 8筛选获得细胞周期蛋白D1反义RNA稳定表达的阳性细胞克隆。用免疫细胞化学、流式细胞仪、分子杂交、病理形态学和细胞生物学方法对该阳性细胞克隆进行检测 ,同时设未经转染和转染空载体胃癌细胞组作对照。结果 阳性细胞克隆细胞周期蛋白D1表达较对照组减少 (抑制率约为 3 6% ) ;细胞体积增大 ,核浆比例下降 ;细胞倍增时间延长 (4 2 .2h比 2 6.8h及 2 6.4h) ,生长饱和密度下降 (1 .9× 1 0 5 比 4.8× 1 0 5 及 4.8× 1 0 5 ) ,G1/G0 期细胞比例增加 (80 .9%比 64 .6%及63 .8% ) ,血清依赖性有所恢复 ,裸鼠成瘤率下降 (0 / 4比 4/ 4及 4/ 4 )。结论 稳定表达细胞周期蛋白D1反义RNA对胃癌细胞SGC790 1 /VCR的恶性表型有一定的逆转作用 ,进一步深入的研究是有意义的。

关 键 词:胃肿瘤  细胞周期蛋白D1  反义基因
文章编号:1000-5404(2001)10-1203-03
修稿时间:2001-07-19

Stable overexpression of cyclin D1 antisense gene reverses the transformed phenotype of human gastric cancer cells
CHEN Bing,CHANG Hang hua,PENG Yi liang,LIU Bao hua,LIU Wei wen,FANG Dian chun,ZHANG Xue yong,FAN Dai ming. Stable overexpression of cyclin D1 antisense gene reverses the transformed phenotype of human gastric cancer cells[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2001, 23(10): 1203-1205
Authors:CHEN Bing  CHANG Hang hua  PENG Yi liang  LIU Bao hua  LIU Wei wen  FANG Dian chun  ZHANG Xue yong  FAN Dai ming
Abstract:
Keywords:stomach neoplasms  cyclin D1  antisense gene
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