含不同启动子的GFP载体在不同种属的胚胎干细胞系中表达效率的研究 |
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引用本文: | 陈红 钱坤 张苏明. 含不同启动子的GFP载体在不同种属的胚胎干细胞系中表达效率的研究[J]. 中国优生与遗传杂志, 2007, 15(5): 17-19 |
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作者姓名: | 陈红 钱坤 张苏明 |
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作者单位: | 陈红(华中科技大学同济医学院附属同济医院康复医学,武汉,430030) 钱坤(华中科技大学同济医学院附属同济医院生殖医学中心,武汉,430030) 张苏明(华中科技大学同济医学院附属同济医院神经科,武汉,430030) |
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基金项目: | 国家自然科学基金面上项目(No:30370505,30600188) |
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摘 要: | 目的 对比含不同启动子的GFP表达载体在hESC及小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cell, mESC)的表达效率,为探索ESC及其衍生细胞移植在体内的存活、迁移、分化及整合提供细胞模型.方法 阳离子脂质体转染hESC及mESC ES-D3,荧光显微镜下观察阳性克隆,流式细胞术(flow cytometry, FCM)计算不同载体pCX-hrGFP、pIRES-hrGFP在不同种属细胞中的表达效率.结果 两种载体在mESC的表达效率分别为pCX-hrGFP 90±2.5%, pIRES-hrGFP 0.67±0.02%, 两组间比较差异有统计学意义(P<0.05).在hESC的表达效率分别为pCX-hrGFP 0.8±0.1%, pIRES-hrGFP 0.62±0.08%,两组间比较有统计学差异(P<0.05).pCX-hrGFP在mESC及hESC间的表达效率差异有统计学意义 (P<0.01),pIRES-hrGFP在mESC及hESC间的表达效率差异无统计学意义 (P>0.05).结论 (1)CBA启动子引导的GFP表达效率高于CMV启动子.(2)同一载体在不同种属细胞内表达效率不同.
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关 键 词: | 胚胎干细胞 基因转染 表达效率 |
文章编号: | 1006-9534(2007)05-0017-04 |
修稿时间: | 2006-10-25 |
Effect of different GFP expression vectors with different promotors on expression efficiency in mouse embryonic stem cells and human embryonic stem cells |
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