~(125)Ⅰ标记SpA实验方法的建立

本文用改良的氯胺T法,以~(125)Ⅰ标记金黄色葡萄球菌A蛋白(SpA)。首先在0.01M PBS中的SpA纯品50μg与~(125)Ⅰ 1～1.5mCi和36μg氯胺T混合2min后加入偏重亚硫酸钠10μg,反应1min。混合物立即用Sephadex G—25过柱层析,以0.1％BSA—PBS洗脱。所得~(125)Ⅰ—SpA经纸电泳法纯度鉴定,只在负极端出现一个峰,用三氯醋酸法进行纯度鉴定。游离碘为3—5％,碘利用率为43.55—73.67％,放射性比度为13.07—17.68mCi/mg,用放免法鉴定,与过量人血清结合率为60.1—66.4％。本文还就排除非特异影响因素进行了探讨。