| 热休克蛋白16.3多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 高绍莹,秦欢,徐林,秦娜琳,于伟娜,丁陈波,袁建波,宋丹,罗军敏.热休克蛋白16.3多克隆抗体的制备[J].细胞与分子免疫学杂志,2014(8). |
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| 作者姓名： | 高绍莹 秦欢 徐林 秦娜琳 于伟娜 丁陈波 袁建波 宋丹 罗军敏 |
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| 作者单位： | 遵义医学院免疫学教研室;贵州省免疫学研究生教育创新基地;遵义医学院医学检验系;遵义医学院护理系; |
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| 基金项目： | 贵州省科学技术基金(黔科合J字[2008]2188);贵州省优秀科技教育人才省长基金(黔科教办[2010]04号) |
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| 摘 要： | 目的大肠杆菌表达Hsp16.3,制备其多克隆抗体。方法设计引物,从H37Rv基因组中扩增出目的片段Hsp16.3,pET28a-Hsp16.3质粒的构建、克隆和表达。对His-Hsp16.3进行诱导、表达和纯化。用纯化好的蛋白免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,用ELISA检测抗血清中多抗的效价,用Western blot法检测多克隆抗体的生物活性。结果重组质粒pET28aHsp16.3在E.coli BL21(DE3)中成功表达,SDS-PAGE结果显示在His-Hsp16.3的相对分子质量(Mr)约为20 000。制备的多克隆抗体效价为1∶800,且特异性较好。结论成功的克隆、表达、纯化出His-Hsp16.3,并且成功制备了抗Hsp16.3多克隆抗体。
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| 关 键 词： | 抗体 基因表达 结核分枝杆菌 |
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