| 人釉原蛋白成熟肽基因的原核表达和纯化 |
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| 引用本文： | 张雪洋,章锦才,赵华. 人釉原蛋白成熟肽基因的原核表达和纯化[J]. 中华口腔医学杂志, 2009, 44(5). DOI: 10.3760/cma.j.issn.1002-0098.2009.05.007 |
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| 作者姓名： | 张雪洋 章锦才 赵华 |
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| 作者单位： | 1. 广东省口腔医院南方医科大学附属口腔医院种植中心,广州,510280
2. 广东省口腔医院南方医科大学附属口腔医院牙周科,广州,510280 |
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| 基金项目： | 广东省科技三项经费计划，广东省医学科学研究基金 |
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| 摘 要： | 目的 建立人釉原蛋白(amelogenin,AMG)成熟肽基因原核表达和纯化的技术路线,获得纯化的人AMG成熟肽蛋白,以期为牙周炎的基础治疗提供依据.方法 通过已构建并经鉴定的重组质粒pGEX-4T-1-AMG,转化BL21大肠杆菌,原核表达后利用谷胱甘肽-S-转移酶融合蛋白纯化系统(glutathione S-transferase fusion protein purification system,GSTrapFF)亲和层析柱进行重组人AMG的纯化.结果 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳图和蛋白质印迹法分析结果显示,获得纯化的相对分子质量为45 000大小GST-AMG融合蛋白和19 000大小的目的 蛋白AMG.结论 利用pGEX-4T-1-AMG-BL21体系成功获得了人AMG成熟肽基因在大肠杆菌中的原核表达和纯化.
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| 关 键 词： | 人釉原蛋白 表达 纯化 |
Expression and purification of human amelogenin mature peptide in Escherichia coil |
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| ZHANG Xue-yang,ZHANG Jin-cai,ZHAO Hua. Expression and purification of human amelogenin mature peptide in Escherichia coil[J]. Chinese journal of stomatology, 2009, 44(5). DOI: 10.3760/cma.j.issn.1002-0098.2009.05.007 |
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| Authors: | ZHANG Xue-yang ZHANG Jin-cai ZHAO Hua |
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| Abstract: | Objective To establish the expression and purification route for human amelogenin mature peptide in Escherichia coli and abtain the purified amelogenin(AMG)mature peptide.Methods Recombined plasmid pGEX-4T-1-AMG was transformed to Escherichia coli BL21.After expression,AMG was purified with glutathione S-transferase fusion protein purification system(GSTrapFF)column.Results Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE)and Western blotting hybridization results showed that 45 000 GST-AMG fusing protein and 19 000 target AMG mature peptide were obtatined successfully.Conclusions pGEX-4T-1-AMG-BL21 system is used successfully to express and purify human AMG mature peptide. |
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| Keywords: | Human amelogenin Expression Purification |
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