槲皮素对肺癌干细胞活性的影响

目的 探索槲皮素对 A549 肺癌干细胞活性及对 Wnt / β-连环蛋白(β-catenin)和音猬因子( sonic hedgehog,SHH)信 号通路的影响。 方法 使用不同浓度槲皮素(0、5、10、25、50、100 和 200 μmol / L)处理肺癌 A549 细胞 24、48 和 72 h,MTT 法检 测细胞存活率。 采用无血清培养法分离富集肺癌干细胞,观察槲皮素对 A549 悬浮细胞球体积、数量以及肺癌干细胞分子标 志物表达的影响;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹法检测增殖凋亡相关指标以及 Wnt / β-catenin 和 SHH 信号通路关键 分子的表达变化。 结果 槲皮素能够显著抑制 A549 细胞活力,且呈现时间和浓度依赖性;与空白对照组相比,槲皮素均显著抑 制 A549 成球能力和肺癌干细胞分子标志物CD133、CD44 和醛脱氢酶 1A1(ALDH1A1)]表达;同时,肺癌干细胞增殖相关蛋 白增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白 D1(Cyclin D1)和 B 细胞白血病/ 淋巴瘤-2(Bcl2)水平显著下调,凋亡相关指标 Bcl2 相关蛋白 X(Bax)和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Cleaved Caspase 3)表达显著上调;槲皮素处理后,肺癌干细胞中 Wnt / β-catenin 和 SHH 信号通路关键分子磷酸化糖原合成酶激酶-3β(p-GSK3β)( Ser9)、β-catenin、原癌基因蛋白 c-Myc、胶 质瘤相关癌基因同源物 1(GLi1)、GLi2 和 SHH 的蛋白水平明显下降。 结论 槲皮素显著抑制肺癌干细胞活性,其机制可能与 调控 Wnt / β-catenin 和 SHH 通路有关。

Effects of quercetin on the activity of lung cancer stem cells