| 摘 要： | 目的研究大量饮酒4 d及乙醇戒断后大鼠脑脊液中及各重要脑区内维生素C(VC)水平及钠依赖性VC转运体2(SVCT2)蛋白水平的变化。方法30只健康Wistar大鼠随机分为5组,对照组(A组)、大量饮酒4 d(B组)、大量饮酒4 d后戒断1 d(C组)、大量饮酒4 d后戒断2 d(D组)、大量饮酒4 d后戒断7 d(E组),每组6只。B、C、D、E组大鼠大量灌胃给予乙醇4 d,乙醇浓度为25%W/V,每8小时灌胃1次,连续4 d;A组给予等体积蒸馏水。采用Y迷宫实验评价大鼠的空间工作记忆能力;以高效液相-电化学法(HPLC-ECD)检测大鼠脑脊液及前额叶皮质、顶叶皮质、颞叶皮质、海马脑区内细胞内VC含量,免疫印迹法检测大鼠各脑区内SVCT2蛋白水平的变化。结果(1)Y迷宫实验:C、D组大鼠自发交替反应率分别为(24.64±15.11)%和(41.48±13.01)%,均显著低于A组[(75.47±8.61)%];E组大鼠的自发交替反应率恢复接近正常[(61.64±11.51)%],与A组差异无统计学意义(P>0.05)。(2)脑脊液内VC含量:B组大鼠脑脊液内VC含量为(204.54±25.51)μmol/L,显著高于A组[(145.57±18.98)μmol/L],而C、D组大鼠脑脊液内VC水平[分别为(90.24±15.45)、(86.93±14.53)μmol/L]明显低于A、B组,差异均有统计学意义(均P<0.001);E组大鼠脑脊液中VC含量[(135.80±17.16)μmol/L]与A组间差异无统计学意义(P>0.05)。(3)各脑区内VC水平:B组前额叶皮质、顶叶皮质、海马脑区脑组织匀浆(细胞内)VC水平变化趋势相同[分别为(1.18±0.13)、(1.14±0.12)、(1.20±0.20)μmol/g],均显著低于A组[分别为(1.64±0.11)、(1.62±0.13)、(2.06±0.27)μmol/g];C组在乙醇戒断后,前额叶皮质、顶叶皮质、海马脑区细胞内VC水平[分别为(1.20±0.29)、(1.05±0.06)、(1.21±0.15)μmol/g]有所恢复,但仍明显低于A组(均P<0.01);C组大鼠颞叶皮质细胞内VC水平[(1.37±0.04)μmol/g]显著高于顶叶皮质(P<0.05);D组各脑区细胞内VC水平均有回升趋势,前额叶皮质细胞内VC水平显著高于顶叶皮质[(1.63±0.24)μmol/g比(1.26±0.16)μmol/g,P<0.05];E组前额叶皮质、顶叶皮质、颞叶皮质、海马区细胞内VC水平[分别为(1.72±0.19)、(1.43±0.22)、(1.67±0.19)、(1.86±0.22)μmol/g]均较B组显著升高(均P<0.01),逐渐恢复至正常水平,海马区VC水平显著高于顶叶皮质(P<0.05)。(4)Western blot结果显示,与A组比较,B、C、D组大鼠前额叶皮质、顶叶皮质及C、D、E组大鼠海马区的SVCT2蛋白均显著升高(均P<0.05)。结论大量饮酒4 d可致大鼠脑损伤,乙醇干预后大鼠脑脊液中及各脑区脑组织匀浆中VC水平呈现负相关的变化过程,此过程中SVCT2蛋白表达上调,这将有助于脑脊液内的VC被转运至各脑区神经元内发挥抗氧化作用。
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